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目的：探讨川楝子水提物对人肺癌A549细胞增殖的影响，并初步研究川楝子水提物作用肺癌A549细胞对ERK途径的影响。 方法：①本课题研究分为实验组和空白对照组，不同浓度的川楝子水提物（100μg/ml，200μg/ml，300μg/ml，400μg/ml）作用人肺癌A549细胞为实验组，未加入药物(0μg/ml)正常培养人肺癌A549细胞为空白对照组。采用MTT法检测经各浓度组川楝子水提物作用48h，对A549细胞增殖的抑制率；②各组川楝子水提物（100μg/ml，200μg/ml，300μg/ml）作用A549细胞(24h、48h、72h）后，采用Western Blot法检测磷酸化状态的细胞外调解激酶1/2（extracellular regulated kinase1/2，ERK1/2）、磷酸化状态的核糖体S6蛋白激酶（ribosomal S6 kinase，RSK）相对分子量为85000～90000（Rsk90）、磷酸化状态C-Jun氨基末端激酶1（c-Jun N-terminal kinase，JNK1）蛋白磷酸化水平；③利用RNA干扰技术成功构建针对ERK1因子序列特异性的干扰载体，通过脂质体瞬时转染细胞，利用显微镜观察及RT-PCR法检测ERK1的mRNA的表达初步确定转染情况；④利用G418筛选法培养稳定转染细胞株；⑤稳定转染的A549-MAPK3-RNAi细胞经各组川楝子水提物（100μg/ml，200μg/ml，300μg/ml）作用24h，采用Western Blot法检测p-ERK1/2、p-Rsk90蛋白磷酸化水平；⑥稳定转染的A549-MAPK3-RNAi细胞经各浓度川楝子水提物（0μg/ml，100μg/ml，200μg/ml，300μg/ml）作用48h，采用MTT法检测对A549-MAPK3-RNAi细胞增殖抑制率的影响。 结果：①随着川楝子水提物药物浓度的加大，对肺癌A549细胞增殖的抑制率逐渐增高（P＜0.05），但药物作用浓度从300μg/ml增加至400μg/ml时，其抑制率变化不明显（P＞0.05）；②Western Blot实验结果显示：川楝子水提物作用肺癌A549细胞24h时，p-ERK1/2、p-Rsk90的蛋白磷酸化水平较空白对照组降低（P＜0.05)，且随药物浓度的增加p-ERK1/2、p-Rsk90的蛋白磷酸化水平逐渐降低（P＜0.05)。48h、72h时，p-ERK1/2、p-Rsk90的蛋白磷酸化水平较空白对照组降低（P＜0.05)，且随药物浓度的增加p-ERK1/2、p-Rsk90的蛋白磷酸化水平逐渐降低（P＜0.05)，但药物浓度300μg/ml的p-ERK1/2、p-Rsk90的蛋白磷酸化水平较200μg/ml蛋白磷酸化水平无明显变化（P＞0.05）。而在实验中发现p-JNK1的蛋白磷酸化水平较空白对照组没有明显变化（P＞0.05），不同时间不同药物浓度之间的p-JNK1的蛋白磷酸化水平均无明显变化（P＞0.05）；③由吉凯基因公司合成的MAPK3-RNAi质粒，做瞬时转染肺癌A549细胞，在电子显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达，证明将质粒成功转染入A549细胞，并通过RT-PCR方法检测ERK1的mRNA的表达量有明显降低（P＜0.05)。利用G418筛选法成功得到ERK1因子稳定低表达肺癌A549-MAPK3-RNAi细胞系；④Western Blot法检测各浓度组川楝子水提物作用转染细胞24h后，p-ERK1/2、p-Rsk90的蛋白磷酸化水平极低，转染细胞各浓度组的p-ERK1/2、p-Rsk90的蛋白磷酸化水平较空白组没有明显变化（P＞0.05），随浓度的增加其蛋白磷酸化水平也无明显变化（P＞0.05）；⑤不同浓度药物作用A549-MAPK3-RNAi细胞时MTT结果显示：不同药物浓度组的抑制率与未加入药物组的抑制率变化不明显（P＞0.05）。 结论：1.川楝子水提物可抑制肺癌A549细胞的增殖。2.川楝子水提物作用肺癌A549细胞时可抑制ERK途径，但对JNK途径无明显影响。3.建立了ERK1因子稳定低表达肺癌A549-MAPK3-RNAi细胞系。4.川楝子水提物能抑制A549细胞的增殖可通过抑制ERK途径实现。