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目的初步研究肿瘤细胞对大肠癌相关成纤维细胞(CCAFs)放射效应的影响,以及辐照后大肠癌相关成纤维细胞对大肠癌细胞的影响。方法采用组织块培养法,将组织块周爬出的成纤维细胞消化,培养至3-4代,免疫荧光鉴定后,与大肠癌细胞共培养并分四组,依次为①非共培养0Gy组②共培养0Gy组③共培养4Gy组④非共培养4Gy组,处理各组后,检测CCAFs的生长、凋亡、自噬以及衰老等放射反应。收集CCL-244/CCAFs共培养(CCAFs组)以及CCL-224/辐照CCAFs共培养(RCCAFs组)条件培养基,并以无血清培养基培养的CCL-224细胞作为空白组,检测各组肿瘤细胞CCL-244的克隆、增殖、生长、迁移能力。结果CCAFs和CNFs都表达成纤维细胞标志物Vimentin;CCAFs表现为α—SMA表达阳性,而CNFs几乎不表达α—SMA;无论共培养与否,辐照组CCAFs的生长活力(OD值)均小于非辐照组(P<0.05),而进行4Gy辐照后,共培养4Gy组与非共培养4Gy组的生长活力在第2、4天无明显差别(P>0.05),但在第6天时,两者OD值出现统计学差异,表现为共培养4Gy组的OD值高于非共培养4Gy组,未辐照的CCAFs的生长活力(OD值)是逐渐增加的,而接受辐射后,无论在共培养组还是非共培养组与否,CCAFs的生长活力(OD值)几乎没有变化;与大肠癌细胞(HCT及CCL)共培养的CCAFs,经4Gy辐照后,凋亡率明显增加(P<0.01),非培养4Gy组CCAFs的凋亡率高于与共培养4Gy组(P<0.01);非共培养4Gy组CCAFs经过辐照后,出现明显的染色反应,细胞数目变少,但细胞体积变大,衰老染色深,而在与大肠癌细胞共培养的CCAFs经过4Gy辐照,亦出现染色反应,但染色细胞数量少,相对染色较浅(p<0.01),且未出现明显的细胞形态学改变;通过对自噬相关蛋白Atg-5、Atg-7和Beclin-1表达的Western blot检测,可见经4Gy辐照后,各组CCAFs的自噬有关蛋白表达增加,辐照后,非共培养4Gy组的CAFs的自噬水平明显高于共培养组。RCCAFs组的肿瘤细胞克隆增殖比为0.6589±0.009493,高于CCAFs组(0.6378±0.01365),但差异无统计学意义(P>0.05),两组均明显高于空白组(0.5200±0.006939),差异具有统计学意义(P<0.01);RCCAFs组反应肿瘤细胞生长能力的吸光度值(OD值)在第3天和第5天分别为0.3502±0.1278和0.6571±0.1351,CCAFs组分别为0.3234±0.00986和0.7116±0.1259,均明显高于空白组(0.2258±0.00536)和(0.4608±0.1382),差距具有统计学意义(P<0.01),但在第3天RCCAFs组的OD值高于CCAFs组差别无统计学意义(P>0.05),第5天RCCAFs组的OD值低于CCAFs组差别有统计学意义(P=0.007);RCCAFs组肿瘤细胞增殖指数(PI)为0.4203±0.01308,低于CCAFs组(0.4491±0.01916),差异无统计学意义(P>0.05),两组均明显高于空白组(0.3381±0.02580),差异具有统计学意义(P<0.05);RCCAFs组的迁移率在48h为(39.33±3.80)%,CCAFs组为(40.12±4.04)%,两组间差异无统计学意义(P>0.05);均高于空白组(21.13±2.89)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CCAFs对辐射并不具有超强耐受力,4Gy单次辐照即可对CCAFs产生生长抑制、凋亡增加、明显衰老和自噬等效应;大肠癌细胞对CCAFs具有一定放射保护作用。4Gy单次辐射并未影响CCAFs对大肠癌CCL-224促生长、增殖与迁移能力。