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目的：本研究复制肝纤维化大鼠模型，通过腹腔注射经脂质体包埋的重组Smad-7与TIMP-1siRNA真核细胞表达质粒，对肝纤维化大鼠进行干预治疗，分析两种质粒及联合作用对大鼠肝纤维化的影响。
材料和方法：
1. 四氯化碳复合因素法建立肝纤维化大鼠模型：40%四氯化碳棉籽油溶液给大鼠皮下注射, 0.3 mL/100 g体重（首次剂量0.5 mL/100 g)，后每隔4天注射一次, 每次3ml/kg, 共注射12次, 20%乙醇溶液作为唯一饮用液体, 并给予高脂高胆固醇饲料。设立正常对照组大鼠, 同期皮下注射生理盐水, 剂量同实验组, 采用标准饲养方法。
2.重组质粒的导入：各干预组及对照组采用脂质体包埋法分别将Smad-7/pcDNA3.1（+）、TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)重组质粒及pcDNA3.1(+)质粒各100μg导入大鼠肝纤维化模型。S组采用Smad-7/pcDNA3.1（+）质粒；T组采用TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)质粒；S+T组采用Smad-7/pcDNA3.1（+）+TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)质粒；空质粒对照组给予pcDNA3.1(+)质粒。同时正常对照组腹腔注射0.9%的生理盐水0.5mL。每7天1次至第8周。注射前各组重组质粒均按比例与脂质体Lipofectmine2000混匀，经腹腔注射法导入大鼠体内。
3. 结果观察：应用苏木素-伊红染色及苦味酸-酸性品红染色观察肝组织病理形态学变化，进行肝纤维化分级；应用免疫组化法观察肝组织中III型胶原蛋白的表达；采用Western blot法检测I型胶原蛋白表达，采用逆转录PCR技术（RT-PCR）检测Smad-2、TIMP-1mRNA的表达，同时检测β-actin的表达作为内参照，用计算机图像分析技术检测以上指标表达的强弱。实验结果计量资料采用SPSS 13.0软件描述实验数据特征，作Kruskal-Wallis法非参数检验(成组设计多样本比较秩和检验及多样本间两两比较秩和检验)，P<0.05显示差异有显著性。等级资料病理形态学分级结果作Ridit分析。
结果：
1. 免疫组化法观察肝组织中III型胶原蛋白的表达：各治疗组III型胶原表达量均较肝纤维化对照组减少，P<0.05，差异有统计学意义；并且联合治疗组与各单一治疗组比较：胶原表达明显减少，P<0.01，差异有统计学意义。
2. Western blot法检测I型胶原蛋白表达：各治疗组I型胶原表达量均较肝纤维化对照组减少，P<0.05，差异有统计学意义；并且联合治疗组与各单一治疗组比较：胶原表达明显减少，P<0.01，差异有统计学意义。
3. RT-PCR检测Smad-2、TIMP-1mRNA的表达：
各治疗组Smad-2mRNA表达量均较肝纤维化对照组减少，P<0.05，差异有统计学意义；并且联合治疗组与各单一治疗组比较：Smad-2mRNA表达量减少，P<0.05，差异有统计学意义。
各治疗组TIMP-1mRNA表达量均较肝纤维化对照组减少，P<0.05，差异有统计学意义；并且联合治疗组与各单一治疗组比较：TIMP-1mRNA表达量减少，P<0.05，差异有统计学意义。
结论：
1.TIMP-1siRNA/pcDNA3.1(+)真核细胞表达质粒及Smad-7/pcDNA3.1(+)真核细胞表达质粒均能降低I、III型胶原蛋白表达水平，尤以TIMP-1 siRNA+Smad-7联合治疗组最为明显；
2.通过同时阻断MMPs-TIMPs系统和TGF-β/Smad-7信号通路进行抗纤维化，比单独阻断其中一条通路抗肝纤维化效果好，进一步证实肝纤维化发生与发展是多种通路共同参与的过程。