粘细菌（myxobacteria）是一类好氧的革兰阴性菌,分类上属于变形杆菌（Proteus）的Delta分支。粘细菌因其具有复杂的多细胞聚集行为特性,且能产生丰富的次级代谢产物而受到广泛关注,在农业、医药、生态环境等方面具有重要的应用价值。从粘细菌中寻找抗肿瘤的药物先导分子已经成为微生物医药技术领域研究的热点。本文从土壤样品中分离纯化得到粘细菌新菌株,研究了该菌株的抗致病菌和抗肿瘤活性,并从中分离纯化到抗肿瘤活性物质,质谱结果显示该物质为一种未见报道的新蛋白质。采用大肠杆菌诱导法从土壤中分离筛选出较高生物活性菌株S72,通过生理生化实验并结合16S r RNA测序方法对该新菌株进行鉴定,并在Gen Bank上获得的登录号为:KP090855,命名为Myxococcus sp.STXZ72,丰富了粘细菌菌种资源,为深入研究微生物来源活性物提供了基础。采用琼脂平板扩散法研究了S72对6种致病细菌的抑制效果,结果表明其对变形肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌具有高效的抑制活性。采用平板对峙培养法研究了S72对5种致病真菌的拮抗效果,结果表明其具有明显抑制枇杷炭疽病菌,烟草黑胫病菌的能力。本文中重点研究了S72菌株次级代谢产物的抗肿瘤活性,其发酵上清液对多种肿瘤细胞有广谱高效抑制效果。对发酵上清液进行理化性质的研究如温度梯度处理、硫酸铵沉淀处理、丙酮沉淀,及蛋白酶K处理,结果表明发酵上清液在大于60℃处理以及蛋白酶K处理后失去抗肿瘤活性,硫酸铵和丙酮沉淀的沉淀有抗肿瘤活性,推测发酵上清液中的主要活性抗肿瘤目的物质属于蛋白质类化合物。我们利用HPLC分离了发酵上清液中的主要抗肿瘤活性成分,发酵上清液经硫酸铵沉淀得到蛋白粗提物,将蛋白粗提物用水溶解经sephadex G75葡聚糖凝胶柱分离,收集3个峰进行活性检测,仅峰2有抗肿瘤活性。取活性峰2进行SDS-PAGE分析,显示单一条带分子量约为45 KDa。切取SDS-PAGE胶上的该目的条带进行质谱检测,结果显示其可能为一种新的未见报道过的蛋白质。采用MTT法检测了分离的蛋白类物质对多种肿瘤细胞生长抑制率,结果表明从S72菌株发酵液中分离到的活性组分能高效的抑制肿瘤细胞He La、4T1、Hep-3、MDA-MB-231、B16、HT-29、HCT-116、H460的生长,其对肿瘤细胞生长抑制半致死浓度IC₅₀分别为84ng/m L、81 ng/m L、73 ng/m L、71 ng/m L、63 ng/m L、62 ng/m L、58ng/m L、41 ng/m L。倒置显微镜分析发现,活性组分作用肿瘤细胞后细胞伪足逐渐消失,在基质上贴壁不紧密,轻晃易漂浮。结合流式细胞检测结果说明其作用机制可能是特异性与肿瘤细胞膜上的贴壁有关物质作用,使肿瘤细胞长时间处于漂浮状态直至死亡,这一结果对于开发抗肿瘤活性药物有重要意义。我们通过在培养基中分别加入低浓度Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Zn²⁺来提高S72产生活性次级代谢产物的产量,结果发现低浓度Cu²⁺能使其生物量明显增加,但并未增加其抗肿瘤活性。该研究对于进一步研究S72抗肿瘤活性物质分子结构,确定抗肿瘤作用分子机制,提高抗肿瘤效果有重要意义。