目的探讨美洲大蠊提取物对人高转移性卵巢癌细胞株HO-8910PM增殖、凋亡、迁移、成血管的作用及作用机制,为其临床辅助治疗卵巢癌提供理论指导。方法1、实验分组:美洲大蠊提取物(10、20、30、40mg/L)组和空白组(未加药)。2、采用MTT法测量不同浓度美洲大蠊提取物对HO-8910PM生长增殖的影响。3、Western blot法检测不同浓度美洲大蠊提取物处理HO-8910PM内AKT、p-AKT、P38、p-P38和ERK1/2、p-ERK1/2及VEGF蛋白的表达,以此推论各组细胞凋亡与PI3K-AKT、Ras/Raf/MEK/ERK和P38 MAPK信号通路的关系及美洲大蠊对HO-8910PM成血管作用的影响。4、利用JC-1染色在荧光显微镜下观察不同浓度美洲大蠊提取物下HO-8910PM细胞的线粒体膜电位变化情况。5、通过Annexin V-FITC双染法经流式细胞仪定量检测不同质量浓度的美洲大蠊提取物对HO-8910PM细胞增殖与凋亡的影响,并测得各组细胞凋亡率。6、细胞划痕实验检测美洲大蠊提取物对细胞迁移作用的影响。结果1、MTT法:作用时间相同时,美洲大蠊提取物可以抑制HO-8910PM的增殖并随药物质量浓度升高其生长抑制率也升高,并计算其IC50为(22.08±1.5)mg/L。2、Western blot:随着美洲大蠊提取物浓度升高,细胞内AKT、ERK1/2、P38磷酸化水平逐渐降低,且AKT、P38和ERK1/2蛋白水平则无明显变化;随着美洲大蠊提取物浓度升高VEGF蛋白表达水平逐步下降。3、JC-1染色:与空白组比较,美洲大蠊药物组细胞的线粒体膜电位下降更显著。4、流式细胞术:空白组及(10、20、30)mg/L药物组的细胞凋亡率分别为(15.1±0.21)、(15.5±0.47)、(20.3±0.89)、(27.1±0.70),此作用呈浓度依赖性,当美洲大蠊浓度低于30mg/L时随PA浓度升高其凋亡率也逐步上升。5、细胞划痕实验:美洲大蠊药物组的细胞增殖能力显著下降,并随着浓度增加甚至出现大面积凋亡的现象。结论美洲大蠊提取物能抑制卵巢癌高转移细胞株HO-8910PM的增殖、促进其凋亡、抑制其迁徙、成血管作用,促凋亡机制可能与通过降低AKT、ERK1/2、P38蛋白磷酸化水平有关。