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研究背景及目的:脐带血(Cord blood,CB)是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液,含有丰富的干细胞,脐带血以前被认为是一种生物废弃物,现已成为用于临床和研究应用的造血干细胞的有用替代来源。与骨髓移植或粒细胞集落刺激因子(Granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)动员的外周血(Peripheral blood,PB)干细胞移植相比,使用脐带血移植物作为干细胞来源为移植受体带来了优点和缺点,例如允许更高程度的人类白细胞抗原(Human leukocyte antigen,HLA)匹配不同,降低移植物抗宿主病(Graft versus host disease,GVHD)的发病率与严重程度,延迟植入或更常见和严重的移植后感染。这些变化是由于脐带血的独特性质所致,信号传导机制改变导致细胞组成不同,例如,淋巴细胞数量占优势,嗜中性粒细胞减少,红细胞计数更高或细胞的免疫原性降低。尽管众所周知脐带血具有不同的生物学特性,但其分子基础仍然知之甚少。本研究通过血常规和流式细胞术分析,检测脐带血中免疫细胞的组成和免疫耐受相关细胞T细胞及表面分子程序性死亡受体1(Programmed death receptor 1,PD-1)的表达,比较新生儿脐带血与母亲外周血免疫耐受功能的差异,探讨其与GVHD发生发展的关系,从而更好地利用脐带血干细胞,降低GVHD的发病率和严重程度,以及提高免疫细胞与分子在临床免疫治疗中的应用。方法:(1)收集健康新生儿脐带血24例,与正常妊娠孕妇外周血23例。(2)通过肉眼观察分析脐带血与外周血血细胞成分差异并用血常规检测两种血液中细胞计数及分类。(3)流式细胞术检测两种新鲜血液中CD34~+造血干细胞的含量、调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的比率、T细胞亚群以及T细胞上PD-1的百分比。(3)两种血液进行植物血凝素(Phytohemagglutinin-L,PHA-L)(2.5μg/m L)体外刺激培养,三天后观察T细胞亚群增殖情况并检测T细胞上PD-1表达的变化情况。结果:(1)通过肉眼观察,新生儿脐带血与母亲外周血在颜色和成分上有明显的差异。血常规结果分析也显示脐带血中红细胞、白细胞含量都相对较高,淋巴细胞与单核细胞也具有明显的差异。(2)通过流式细胞术检测出新鲜脐带血中CD34~+造血干细胞含量明显相对外周血高(P<0.05)。(3)流式细胞术检测出新鲜脐带血中Treg细胞比率也较新鲜外周血高(P<0.05),新鲜脐带血中CD4~+T细胞上PD-1的表达水平明显低于外周血(P<0.001)。(4)PHA-L体外刺激脐带血发现,PD-1在CD3~+CD4~+T细胞和CD3~+CD8~+T细胞上表达均升高(P均<0.05);PHA-L体外刺激外周血发现,PD-1在CD3~+CD4~+T细胞上表达升高(P<0.05),在CD3~+CD8~+T细胞上表达升高无统计学意义。结论:新生儿脐带血含有更多的造血干细胞,且与母亲外周血存在较大的生物学差异。新生儿脐带血Treg细胞比率较母亲外周血高,而脐带血T细胞上PD-1表达量较低,但活化后表达升高更明显,可能是脐带血作为移植物能够降低移植物抗宿主病(GVHD)发病率和严重程度的原因。