姜黄素下调miR-9抑制人结肠癌SW480细胞增殖与迁移的初步研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:delphizhao
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目的:探讨姜黄素调控miR-9(Homo sapiens miR-9)的改变在抑制结肠癌细胞增殖、迁移中的作用及其机制。方法:通过qRT-PCR的方法,分别检测结肠癌细胞株(姜黄素处理组和DMSO对照组)中miR-9的表达水平;采用MTT、细胞划痕法研究姜黄素调控的miR-9促进人结肠癌SW480细胞的生长侵袭能力;运用Western blot方法研究miR-9直接调控的靶基因E-cadherin。结果:MTT结果显示,1、5、10、20μmol/L姜黄素作用结肠癌SW480细胞24h、48h、72h后,与DMSO对照组细胞相比,增殖抑制率分别为21.87%、27.81%与50.79%,29.34%、39.62%与58.38%,37.78%、32.78%与68.37%和44.81%、54.31%与72.35%,表明姜黄素可呈剂量与时间效应抑制SW480细胞增殖(P<0.05)。qRT-PCR结果发现,姜黄素较对照组miR-9表达下调0.64±0.06倍(P<0.05)。转染miR-9抑制剂于SW480细胞12h、24h和48h后,转染组的抑制率分别达40.16%、51.19%与60.56%(P<0.05)。表明下调miR-9可呈时间依赖性抑制SW480细胞的增殖。细胞划痕实验显示,转染miR-9抑制剂24h与48h后,SW480细胞伤口愈合率分别为0.375±0.012和0.556±0.026,明显慢于对照组0.538±0.012和0.803±0.008(P<0.05)。Western blot结果显示,SW480细胞转染miR-9抑制剂24h后,miR-9抑制剂组与miR-9抑制剂+姜黄素组的E-cadherin蛋白表达分别为0.67±0.03与1.12±0.03,较对照组0.33±0.05明显上调(P<0.05)。表明姜黄素可通过下调miR-9,上调E-cadherin表达,抑制结肠癌细胞的增殖与迁移。结论:1.姜黄素可通过下调miR-9表达,抑制结肠癌SW480细胞增殖;2. miR-9可通过下调E-cadherin蛋白表达,促进结肠癌细胞迁移。
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