工作目的：建立母血浆中胎儿游离DNA分离提取的技术,利用SRY基因和RASSF1A基因检测胎儿游离DNA,并比较它们的检出率。利用母血浆中胎儿游离DNA分别结合传统巢式PCR法和低变性温度共扩增PCR法(COLD-PCR)对先天性肾上腺皮质增生症(CAH)的父源性致病点突变进行无创性产前遗传学诊断研究。研究方法：提取30例母血浆样本中的总DNA,应用Real-timePCR法对其中胎儿游离DNA成分进行SRY基因和RASSF1A基因的检测。提取1名曾生育CAH患者的孕妇的血浆DNA,分别应用传统巢式PCR法和COLD-PCR法扩增其中胎儿游离DNA中的CYP21基因片段,对产物进行变性高效液相色谱技术(dHPLC)和限制性酶切分析来检测父源性Q318X致病点突变。结果：30例母血浆中胎儿游离DNA样本中,16例检出了SRY基因,检出率为88.9%；26例检出了RASSF1A基因,检出率为86.7%。采用传统巢式PCR法和COLD-PCR法扩增CYP21基因片段后,dHPLC法和酶切分析法均检测到该胎儿遗传了父源性致病点突变Q318X,与羊水产前诊断结果一致。使用COLD-PCR法扩增后突变检测的效果要明显优于传统巢式PCR法。结论：建立了有效和稳定地分离提取母血浆中胎儿游离DNA的技术。运用胎儿游离DNA成功对一例CAH风险胎儿进行了无创性产前诊断。为开展其他单基因病的无创性产前遗传学诊断研究提供了新的思路。