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目的宫颈癌是发展中国家妇女最常见的恶性肿瘤,其发病率占女性生殖器官恶性肿瘤的首位,是危害妇女健康及生命的重要因素,大量研究证实宫颈癌与人乳头状瘤病毒(HPV)感染有关,然而并非感染HPV就注定发展为宫颈癌,提示有其他因素共同参与宫颈癌的恶性转化过程。氯离子通道是细胞的主要阴离子通道,在细胞膜电位,调节细胞跨上皮转运,维持胞内pH值及在细胞容积调节等方面氯通道都发挥重要的作用,CLC-3属电压门控性氯离子通道,但其又有容积调控氯通道的部分特性,近年研究发现:CLC-3在细胞周期的调控,细胞凋亡,细胞黏附,细胞动力学方面都有一定的作用。在人宫颈癌细胞系中高增殖细胞的CLC-3氯通道基因表达明显大于静止期细胞。CLC-3在宫颈癌组织中的表达情况尚不清楚,故本研究的目的是利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法探讨电压门控性氯离子通道(CLC-3)在子宫颈癌组织中的表达及临床意义。材料和方法1、标本的采集取自中国医科大学附属第一医院妇科2005年6月至2007年9月宫颈活检和手术切除之标本,宫颈癌70例,其中有10例宫颈癌组织为治疗前和放化疗两周时先后取材,正常宫颈组织标本10例。试验标本均经组织病理学诊断证实。宫颈癌患者的临床病理资料包括:①年龄:以40岁为界分为两组,＜40岁组38例及≥40岁组32例;②采用国际妇科联盟(FIGO)分期标准:Ⅰ-Ⅱ期41例,Ⅲ-Ⅳ期29例;③根据组织学分类:G1:高分化14例,G2:中分化40例,G3:低分化(或未分化)16例;④治疗前后:同一患者治疗前及放化疗两周时配对,共10对。2、方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CLC-3mRNA在60例宫颈癌组织,10例经放化疗前后的宫颈癌组织,10例正常宫颈组织中的表达。3、结果判定取6μlRT-PCR反应产物与4μl 6×loading buffer混匀后取7μl在2%的琼脂糖凝胶上电泳,同时选DL-2000为Marker,电脑成像灰度值测定。通过比较各样本CLC-3及内参照β-actin的光密度值,将结果进行半定量分析(即将组织样本中的CLC-3mRNA的PCR产物与细胞中恒定表达的β-actin mRNA的PCR产物的灰度值进行比较),最终得出CLC-3mRNA在宫颈癌及宫颈正常组织中的相对含量。4、统计学处理所有数据资料均采用SPSS13.0软件进行统计处理,各组计量资料的结果采用t检验和方差分析,P＜0.05有统计学意义。结果1、正常宫颈组织和宫颈癌中CLC-3mRNA的表达CLC-3mRNA在正常宫颈组织中的表达的灰度值比值为0.6912与宫颈癌组织中的2.3937相比,有显著性差异(P=0.001)。2、各种临床病理因素间宫颈癌CLC-3mRNA的表达CLC-3mRNA在G1期中表达为1.3187、G2期为1.5718,与G3期的4.5899相比,有显著性差异(P=0.002)。CLC-3mRNA在G1、G2期中的表达无显著性差异,CLC-3mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为1.0842,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期表达为3.5688,两者有显著性差异(P=0.001)。在年龄≥40岁组CLC-3mRNA的表达为1.3583与年龄＜40岁组的1.2421比较,二者之间无显著性差异(P=0.665)。3、CLC-3mRNA在宫颈癌放化疗前、后组织中的表达CLC-3mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.5198,放化疗两周时CLC-3mRNA表达为0.2237相比,二者相比有显著性差异(P=0.003)。结论1、CLC-3基因参与宫颈癌恶性增殖过程,提示氯离子通道的激活与宫颈癌变有关。2、CLC-3基因与宫颈癌的临床分期及病理分级呈正相关,提示氯通道的激活与宫颈癌的预后不良相关。3、放化疗可抑制氯通道CLC-3基因的表达。