西洋参稀有人参皂苷抗炎抗氧化活性研究

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yaoyaoqi
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近年来,随着人们生活品质的逐步提升,越来越多的人开始重视养生和保健。西洋参(Panax quinquefolium L.)可谓是补血益气、健脾益肺、养血生津的名贵中药材,其主要活性成分是人参皂苷。目前研究发现人参皂苷具有抗炎、抗肿瘤、降血糖、抗衰老、抗氧化等多种生物活性,而经过食药用真菌发酵制备的稀有人参皂苷提取物其抗炎抗氧化等生物活性更强,且更易被人体吸收。本文以人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)活性、抗氧化活性和抗炎活性为衡量指标,对不同菌株发酵的稀有人参皂苷样品进行不同活性的测定和研究。一方面可以筛选得到促进PBMC细胞活性的同时抗炎抗氧化活性高的稀有人参皂苷提取物样品,另一方面也帮助我们了解其由常见人参皂苷发酵为稀有人参皂苷的发酵提取方式。这不仅在保健品领域有非常广阔的前景,也可能对包括新冠肺炎在内的很多疾病的治疗提供一定的思路和理论支持。首先,利用聚蔗糖(Ficoll)密度梯度离心法从人体静脉血中分离得到PBMC,然后利用噻唑蓝(MTT)法检测不同的稀有人参皂苷提取物样品对PBMC细胞是否有毒性、是否促进PBMC细胞活性。结果显示,稀有人参皂苷发酵样品P29-XM3-25、P29-XM3-55、P31-XM3-35和P31-XM3-40对PBMC细胞无毒性作用且能够显著促进PBMC细胞活性。此外,与未发酵的对照组XM3-CKA相比,发酵样品P29-XM3-25、P29-XM3-55、P31-XM3-35和P31-XM3-40的细胞活性分别提高了44.55%、41.59%,43.55%和40.74%。经过复筛验证结果一致。最终筛选出的抗炎抗氧化活性强的发酵样品P31-XM3-35促PBMC细胞活性的最佳作用浓度为40μg/m L,最佳作用时间为48 h。其次,分离得到的红细胞用于检测稀有人参皂苷提取物样品的抗氧化活性。利用2,2’-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(AAPH)诱导红细胞溶血,用稀有人参皂苷提取物样品干预培养,通过计算溶血抑制率来表征样品的抗氧化活性,溶血抑制率越高代表抗氧化活性越强。结果显示,与维生素C阳性对照组和XM3-CKA未发酵对照组相比,稀有人参皂苷发酵样品P29-XM3-60和P31-XM3-35的溶血抑制率显著升高。说明P29-XM3-60和P31-XM3-35样品的抗氧化活性明显高于维生素C和XM3-CKA。最终筛选出的抗炎抗氧化活性强的发酵样品P31-XM3-35抗氧化的最佳作用浓度为20μg/m L。最后,通过大肠杆菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导炎症细胞模型,利用稀有人参皂苷提取物样品干预培养PBMC细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)的表达水平。结果显示,稀有人参皂苷发酵样品P31-XM3-35能够显著抑制LPS诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平升高,并且在作用浓度为40μg/m L时其抑制效果最佳,说明P31-XM3-35抗炎的最佳作用浓度为40μg/m L。综上所述,西洋参稀有人参皂苷发酵样品P31-XM3-35不仅具有促进PBMC细胞活性,而且具有高抗炎和抗氧化活性,其促进PBMC活性的最佳作用浓度为40μg/m L,最佳作用时间为48 h,抗氧化的最佳作用浓度为20μg/mL;抗炎的最佳作用浓度为40μg/mL。
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