【摘 要】
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【目的】探讨BAFF在LPS诱导的脓毒血症小鼠模型中的表达情况,通过使用BAFF抗体干预探究BAFF在小鼠LPS诱导的脓毒血症中的作用,以及对脓毒血症小鼠小肠黏膜上皮屏障的调控作用及其机制。【方法】建立LPS诱导的小鼠脓毒血症模型,检测小鼠血清、回肠、结肠、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏中的BAFF蛋白水平表达。腹腔注射BAFF中和抗体干预LPS诱导的脓毒血症小鼠模型,每日观察小鼠存活情况进行生存评估,E
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【目的】探讨BAFF在LPS诱导的脓毒血症小鼠模型中的表达情况,通过使用BAFF抗体干预探究BAFF在小鼠LPS诱导的脓毒血症中的作用,以及对脓毒血症小鼠小肠黏膜上皮屏障的调控作用及其机制。【方法】建立LPS诱导的小鼠脓毒血症模型,检测小鼠血清、回肠、结肠、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏中的BAFF蛋白水平表达。腹腔注射BAFF中和抗体干预LPS诱导的脓毒血症小鼠模型,每日观察小鼠存活情况进行生存评估,ELISA检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10等炎症因子水平评估脓毒血症小鼠的系统性炎症程度,检测ALT、AST、Cr和LDH来评估各器官组织炎症损伤程度,通过回肠组织切片H&E染色以及回肠组织MPO检测评估小肠炎症程度,ELISA检测血清中DAO、D-lactate、FITC-dextran水平评估肠道通透性变化,RT-q PCR检测小鼠小肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10等炎症因子m RNA表达水平,提取小鼠小肠原代上皮细胞后用RT-q PCR检测原代小肠上皮细胞IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10等炎症因子表达,Western Blot检测小鼠小肠组织ZO-1、occludin等肠道屏障蛋白表达以及IκB-α/p-IκB-α、p65/p-p65、mlc/p-mlc、mlck等通路蛋白表达。【结果】与对照组相比,LPS诱导的脓毒血症小鼠血清、小肠、结肠、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏中BAFF表达均明显增加,BAFF抗体干预可显著增加脓毒血症小鼠存活率,下调血清中IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子表达水平,可显著减轻小肠组织损伤程度,并使血清中DAO、D-lactate、FD-4浓度降低,同时下调了小肠组织和原代小肠上皮细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10等炎症因子m RNA水平的表达。脓毒血症小鼠ZO-1、occludin等肠道黏膜屏障蛋白表达下降,而pIκB-α、p-p65、p-mlc、mlck等通路蛋白表达升高,而BAFF抗体干预可增加ZO-1、occludin表达并下调上述通路蛋白表达。【结论】BAFF在小鼠脓毒血症模型中表达升高,拮抗BAFF可通过调节肠道黏膜通透性和屏障功能,减轻小肠损伤程度,缓解脓毒血症的系统性炎症,从而增加脓毒血症小鼠存活率,可成为脓毒血症的潜在治疗靶点。
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