抗原的磁分离及其表面增强拉曼光谱检测

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以金为壳层材料的磁性复合纳米粒子,由于表面易修饰、光学增强性及内核磁性等特点使其在物质的分离和检测过程中具有广泛的应用前景。表面增强拉曼光谱(SERS)具有极高的检测灵敏度以及可提供物质丰富的结构信息,已被广泛用于分析检测等领域。免疫分析是生物分析中的有力工具,其具有很高的特异性。将SERS、磁分离及免疫分析的特异性三者的优点结合,可望用于特异性分离和高灵敏度检测中。本文在此前提下,从材料的制备出发,构建了集以上三种优点的复合材料并尝试了在免疫分离分析中的应用。论文主要开展了以下研究工作:(1)制备了不同磁性的水溶性顺磁性γ-Fe2O3@Au、Fe3O4@Au磁性核壳纳米粒子,通过各种方法对其进行了相关性能的表征,并实现了表面修饰,构建了免疫磁性核壳纳米粒子。(2)发展了新型磁分离免疫分析方法,利用修饰标记分子的免疫金溶胶和免疫磁性核壳纳米粒子间通过抗原的特异性作用,结合磁富集分离实现了目标抗原的高灵敏度检测,分别从特异性、检测限和灵敏度等方面考察了该技术的性能,并与常规基于SERS的“三明治”结构免疫分析法进行了对比,发现其检测限提高了1个数量级,达1fg/mL。(3)利用磁分离免疫检测法实现了三组分抗原的分离,并基于SERS进行了分离效率的评估。分别进行了三种抗原的逐个分离,两种抗原的同时一次分离,三种抗原的同时一次分离及不同浓度二组分抗原的分离。结果表明:此磁分离法具有很高的特异性,可对特异性的抗原进行分离而不影响其它抗原的存在,分离和检测限可达0.1pg/ml。(4)发展基于SERS的免疫竞争检测技术,并用于Hg2+检测中,利用特异性的含Hg2+的抗原与溶液中Hg2+的竞争作用,根据标记分子SERS强度的减弱程度实现对Hg2+的半定量检测,并考察了其它离子对Hg2+检测的影响。该方法具有很高灵敏度、高特异性及极低的检测限特点,可望成为特异性物质检测的新型高灵敏度工具。
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