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背景和目的动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是导致心肌梗死和脑梗塞的主要原因。AS病变形成的核心环节是泡沫细胞的形成和聚集。血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells,VSMCs)源性泡沫细胞在AS中具有重要作用,但是其具体的机制仍不十分清楚。正常情况下,滞留于动脉壁上的脂质成分,尤其是氧化修饰的LDL可刺激VSMCs做出如下改变:分泌多种细胞外基质、进行表型转换、促进脂蛋白滞留、修饰上调脂蛋白受体、减少胆固醇流出,形成泡沫细胞加速AS的形成,引发心脑血管疾病。因此研究VSMCs源性泡沫细胞形成的具体机制对于预防和治疗AS具有非常重要的意义。过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-activated receptorδ,PPARδ)属于配体激活的转录因子核受体超家族成员之一。PPARδ在AS起始形成和进展中的作用受到越来越多的关注。PPARδ广泛表达于全身所有的组织,通过作用于靶分子启动子,调控其表达,进而调节细胞代谢、炎症和增殖等。研究发现PPARδ能够抑制巨噬细胞(Macrophage,Mo)的泡沫化。PPARδ同样对于VSMCs的多个生理病理过程具有重要的调节作用。但是PPARδ对于VSMCs的泡沫细胞形成过程调控作用及机制尚不清楚。因此,本课题着重探索激活PPARδ是否影响VSMCs的泡沫化。酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferases,ACAT1)是一个多重跨膜的膜蛋白,主要催化游离胆固醇酯化产生胆甾醇酯,在维持细胞内胆固醇稳态中发挥重要的作用,并作为治疗AS的药物干预靶点。大量研究表明抑制ACAT1能够发挥抗AS作用。我们推测:激活PPARδ后是否通过ACAT1途径影响VSMCs源性泡沫细胞的形成。本研究分为2个部分。第一部分:观察PPARδ对VSMCs的泡沫细胞形成的影响。第二部分:初步探讨PPARδ对VSMCs泡沫化影响的可能机制。方法:1.培养C57BL/6J小鼠原代VSMCs采用组织块贴块法,鉴定VSMCs采用细胞免疫荧光染色。2.PPARδ、ACAT1蛋白表达水平检测用Western Blot法和细胞免疫荧光染色法。3.脂质沉积观察采用油红O染色法及细胞内油红光密度值采用酶标仪测量。结果:1.在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)诱导的VSMCs泡沫细胞形成过程中,PPARδ的蛋白表达水平呈时间依耐性降低,在48h达到最低值,并维持在较低水平。2.分别应用PPARδ的激动剂GW0742和抑制剂GSK0660,观察oxLDL诱导的VSMCs泡沫细胞形成的影响,发现激活PPARδ后VSMCs内的脂质沉积和胆固醇量明显减少,而抑制PPARδ则明显增多,差异具有统计学意义。3.ox LDL诱导的VSMCs泡沫样变中ACAT1的蛋白表达增高。4.PPARδ的激动剂GW0742和抑制剂GSK0660干预VSMCs源性泡沫细胞形成时,同时发现激活PPARδ后ACAT1的表达水平明显降低,而抑制PPARδ后ACAT1的表达水平则明显升高,差异具有统计学意义。结论:激活PPARδ可能通过下调ACAT1的表达抑制VSMCs源性泡沫细胞的形成。