血管内皮细胞系(ECV304)表达HLA-G1诱导同种异体免疫耐受的实验研究

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目的与方法:为了模拟在同种异体器官移植时,发生的排斥反应对血管内皮细胞影响的情况,特选用人脐静脉血管内皮细胞系ECV304,该细胞系的特点为:表达HLA-Ia分子;易于在体外培养扩增;适于借助脂质体转染外源基因并可稳定表达外源基因产物.由于这些特点,ECV304作为靶细胞,能模拟同种异体移植时T细胞和NK细胞对血管内皮细胞的损伤情况.该研究采用脂质体基因转染技术,将该室已构建好的真核表达质粒HLA-G1-pcDNA3转染至人脐静脉血管内皮细胞系ECV304中,建立稳定表达HLA-G1的细胞株ECV304-G1(用间接免疫荧光法鉴定),探讨HLA-G1诱导同种异体T细胞和NK细胞产生免疫耐受的作用,包括对T细胞增殖、NK细胞和细胞毒性T细胞杀伤活性的影响,以期为进一步探讨HLA-G分子的生物学功能建立实用的细胞模型.结论:上述结果揭示了表达在血管内皮细胞的HLA-G1分子对同种异体人T细胞的活化、增殖阶段有抑制作用,能抑制NK细胞、CTL细胞的杀伤作用.提示HLA-G1分子可作为免疫耐受诱导剂,在临床上具有潜在的应用前景,可望用于治疗自身免疫病和防治器官移植排斥反应.
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