刺梨质量标准的研究及炮制方法的探讨

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目的:通过对刺梨质量标准的研究及炮制的方法的初步探讨,完善刺梨的质量标准,为刺梨资源的合理利用和开发提供依据,地方标准提升为药典标准奠定基础。  方法:本研究以刺梨(Rosae roxburghii Tratt.)为研究对象,收集不同产地的刺梨样品,通过薄层鉴别试验,检查、维生素C、总黄酮、总多酚的提取方法及含量测定的方法学研究及16种氨基酸的测定,全面系统的研究了刺梨的质量控制方法。  采用蒸、微波干燥等方法对刺梨鲜果进行炮制方法初步探讨,以维生素C、总黄酮、总多酚为测定指标,采用色谱法、比色法等测定其含量,比较炮制前后其含量的变化,探讨刺梨炮制工艺。  结果:1、以没食子酸为薄层鉴别指标,聚酰胺薄膜为载体,2%的Fecl3乙醇溶液显色,作鉴别实验,在与没食子酸相同位置显相同颜色的蓝紫色斑点。2、参照药典附录IX H第二法测定水分,附录IX K法测定灰分,附录X A法测定70%乙醇的浸出物,采用原子荧光法测定砷、汞。3、以1%的偏磷酸为提取溶剂,选择迪马C18钻石柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长为245nm,柱温:30℃;0.1mol/L磷酸二氢钾-甲醇(97:3)为流动相,流速1.0mL/min为刺梨维生素C含量测定的色谱条件,结果:在1.981μg~9.904μg范围内线性关系良好,回归方程为得回归方程为:Y=114853x-18427,(R2=0.9997),平均加样回收率为94.69%(n=9)。4、采用三氯化铝比色法测定刺梨总黄酮的含量,在0~23.05μg/mL范围内线性关系良好,r2=0.9997,回归方程为A=0.02727C-0.01618;加样回收率为100.89%。5、采用Folin-Denis比色法测定刺梨多酚的含量,结果在1.92μg/mL~6.72μg/mL范围内线性关系良好,线性方程为A=0.1032C-0.0183,r2=0.9996。6、柱前衍生化法测定刺梨氨基酸的含量,色谱柱为Venusil-AA氨基酸分析柱(4.6×250mm,5μm),流动相为80%乙腈-(醋酸钠-HAc缓冲液pH=6.5)梯度洗脱0-2minB泵(80%乙腈)0mL,2-15minB泵10%,15-25minB泵30%,25-33minB泵45%,33-33.1minB泵100%,33.1-38minB泵100%,38.1minB泵0%,45minB泵0%,流速1.0mL/min,柱温40℃,检测波长254nm,进样量2μL。结果:测定出刺梨中16种氨基酸的含量,且在1.19μmol/mL~11.9μmol/mL范围内线性关系良好。7、通过对炮制方法的初步探讨,发现以维生素C、总黄酮、多酚为指标,蒸2min,微波干燥较好。  结论:本实验增加了薄层鉴别项、维生素C、总黄酮、多酚、氨基酸含量测定项,并对炮制方法进行初步探讨,对刺梨质量标准进行完善,制定刺梨质量标准草案。
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