药物主成分的测定、杂质的分析、药物品质测试等都离不开定量工作,因此定量分析是必不可少的内容。随着科学技术的迅速发展,现代分析测试技术和设备仪器的迅猛发展,衍生出了各式各样的检测技术,如气相色谱法、高效液相色谱法、离子交换树脂法等。而毛细管电泳法以其较高的分离效率,较短的分析时间,较低的成本消耗等特点成为目前应用比较广泛的检测技术之一,是解决各自领域中一些新问题的得力工具。本文以响应曲面法优化了旋覆花、通经草、罗布麻、刺五加等中草药中各自几种成分的毛细管电泳分离条件,并对样品中的部分成分进行了含量测定,为其质量评价提供了新方法。目的:1.采用响应曲面法优化芦丁、槲皮苷和绿原酸的毛细管电泳分离条件,建立了一种毛细管电泳分析旋覆花中芦丁、槲皮苷和绿原酸的方法。为进一步开发利用旋覆花中草药资源提供一定的参考依据。2.采用响应曲面法优化芦丁和异槲皮苷的毛细管电泳分离条件,建立了一种毛细管电泳分析芦丁和异槲皮苷的方法。利用该方法对不同产地通经草样品中芦丁和异槲皮苷进行了测定。3.采用响应曲面法优化刺槐素和染料木素的毛细管电泳分离条件,建立了一种毛细管电泳法分析罗布麻中刺槐素和染料木素的方法。为进一步开发和利用罗布麻中草药资源提供一定新方法。4.建立了分散液液微萃取-毛细管电泳法测定中药刺五加中大豆苷元和槲皮素的方法。以乙酸乙酯为萃取剂、乙腈为分散剂,采用分散液液微萃取技术对大豆苷元和槲皮素进行分离提取,并结合毛细管电泳法进行测定。此法应用于市售中草药刺五加中大豆苷元和槲皮素的分析,取得了较满意的结果。方法:1.旋覆花中芦丁、槲皮苷和绿原酸的毛细管电泳分离条件如下:以30 mmol/L硼砂-0.5 mol/L硼酸-4.37 mmol/L BMIM-PF6(pH 9.0)作为工作缓冲溶液,工作电压为16 kV,压差进样(高度为11.5 cm),进样时间为20 s,检测波长为354 nm。2.通经草中芦丁和异槲皮苷的毛细管电泳分离条件如下:以23 mmol/L硼砂-1.0mol/L硼酸-5.34 mmol/L BMIM-PF6(pH 8.7)作为工作缓冲溶液,工作电压为18 kV,压差进样(高度为11.5 cm),进样时间为15 s,检测波长为354 nm。3.罗布麻中刺槐素和染料木素的毛细管电泳分离条件如下:以35 mmol/L硼砂-1.0mmol/L硼酸-10 mmol/Lα-环糊精(pH 9.0)作为工作缓冲溶液,工作电压为11 kV,压差进样(高度为11.5 cm),进样时间为15 s,检测波长为214 nm。4.刺五加中大豆苷元和槲皮素的毛细管电泳分离条件如下:以25 mmol/L硼砂-1.0mol L硼酸(pH 9.0)为工作缓冲溶液,工作电压为16 kV,压差进样(高度为11.5 cm),进样时间为5 s,检测波长为214 nm。以77μL乙酸乙酯为萃取剂、980μL乙腈为分散剂,采用分散液液微萃取技术对大豆苷元、槲皮素进行提取分离。结果:1.在优化的条件下,旋覆花中的芦丁、槲皮苷和绿原酸在10 min内得到良好分离。其峰面积和浓度分别在2-100,2-250和2-200 mg/L范围内呈良好线性关系。芦丁、槲皮苷和绿原酸的检出限分别为0.6,0.6和0.5 mg/L。方法用于分析旋覆花样品并做加标回收试验,芦丁、槲皮苷和绿原酸的回收率分别为102.6±2.7%、97.4±4.1%和97.2±3.8%。2.在优化的条件下,通经草中的芦丁和异槲皮苷在10 min内得到良好分离。其峰面积和浓度分别在2-200、2-250 mg/L范围内呈良好线性关系。两者的检出限分别为0.6,0.4 mg/L。方法用于分析通经草样品并做加标回收试验,芦丁和异槲皮苷的回收率分别为107.9±4.6%和102.4±4.8%。3.在优化的条件下,罗布麻中的刺槐素和染料木素在10 min内得到良好分离。其峰面积和浓度分别在2-200、2-400 mg/L范围内呈良好线性关系。刺槐素和染料木素的检出限分别为0.7和0.5 mg/L。方法用于分析罗布麻样品并做加标回收试验,刺槐素和染料木素的回收率分别为102.9±3.9%和100.6±4.8%。4.采用分散液液微萃取对刺五加中的大豆苷元和槲皮素进行提取分离,并结合毛细管电泳法进行测定。该方法可以有效提取分离大豆苷元和槲皮素并对其进行含量测定,两种分析物分别在2-400 mg/L和2-200 mg/L范围内线性关系良好,仪器检出限为0.6 mg/L,此法应用于市售中草药刺五加的测定,取得了较满意的结果,大豆苷元的加标回收率为93.01±3.92%;槲皮素的加标回收率为98.48±4.50%。结论:本研究通过单因素试验和响应曲面法,借助Design-Expert8.0软件优化了中草药刺五加成分的萃取分离条件和旋覆花、通经草、罗布麻成分的毛细管电泳分离条件,该方法方便、快速、成本低,有望用于上述几种中药质量分析。