刺激性G蛋白在病理性瘢痕和正常皮肤表达的研究

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目的观察病理性瘢痕组织和正常皮肤的刺激性G蛋白(GS)的表达和表达差异。探讨刺激性G蛋白(GS)在病理性瘢痕组织和正常皮肤中的作用。方法手术切取18-38岁的我烧伤中心瘢痕整形手术病人的病理性瘢痕和术中多余全厚正常皮肤各20例,病理性瘢痕和正常皮肤均取自同一个病人。以上标本均经过病理HE染色证实。把标本分成两组即病理性瘢痕组和正常皮肤组。每组各20例。通过RT—PCR法对标本进行mRNA表达的检测。对部分标本应用TRIZOL法进行总RNA的提取,将提取的总RNA进行纯度检测,无降解的进行逆转录,将得到的CDNA,进行扩增。电泳和凝胶图象处理系统分析和拍照。取部分标本进行免疫组织化学法检测。对标本进行固定,常规石蜡包埋,连续切片,贴片。进行抗原热修复。按SP法:滴加一抗、二抗、染色、脱水、脱蜡、封片。显微镜下观察。结果1、RT-PCR法检测发现病理性瘢痕和正常皮肤均有刺激性G蛋白(GαS)表达。2、利用凝胶图象处理系统分析,病理性瘢痕刺激性G蛋白条带和内参照(β-actin)灰度值比值与正常皮肤刺激性G蛋白条带和内参照(β-actin)灰度值比值存在差异。前者比值更大。所得数据经统计学分析,利用t检验发现(P<0.05)差异有显著性意义。3、利用免疫组织化学法(SP法)对标本染色后大体观察发现两种组织均有刺激性G蛋白的表达。表达分布在表皮的基底细胞内、真皮的成纤维细胞内和毛细血管的内皮细胞内。两种组织的表达分布没有明显差异。4、病理性瘢痕组织的基底细胞和正常皮肤的基底细胞表达均为阳性,但无明显差异。病理性瘢痕中成纤维细胞内和毛细血管的内皮细胞内的表达均为强阳性,正常皮肤中两种细胞表达均为阳性。表达存在差异。结论1、刺激性G蛋白可能参与了病理性瘢痕和正常皮肤的细胞跨膜信号传导。2、刺激性G蛋白可能参与了病理性瘢痕和正常皮肤中表皮基底细胞、真皮的成纤维细胞和毛细血管内皮细胞的细胞跨膜信号传导。3、在病理性瘢痕和正常皮肤的表皮细胞的增殖中刺激性G蛋白可能起到大体相等的作用。4、病理性瘢痕中真皮的成纤维细胞和毛细血管内皮细胞的过度增殖可能与刺激性G蛋白高表达有关。
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