【摘 要】
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养心菜为景天科景天属,它是一种多年生的草本植物,同时兼具药食两用功能。糖尿病已经是继癌症和心血管疾病后的世界第三“无声杀手”。中国是糖尿病大国。研究表明,具有抗氧化性和清除自由基活性的黄酮化合物可以治疗胰岛β细胞的功能障碍及对脂质过氧化有抑制作用。本研究以养心菜为原料,采用响应面法获得养心菜总黄酮的最佳提取条件,选取最佳提取工艺方案提取的养心菜总黄酮,以抗坏血酸（Vc）做阳性对照,进行二苯代苦味肼
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养心菜为景天科景天属,它是一种多年生的草本植物,同时兼具药食两用功能。糖尿病已经是继癌症和心血管疾病后的世界第三“无声杀手”。中国是糖尿病大国。研究表明,具有抗氧化性和清除自由基活性的黄酮化合物可以治疗胰岛β细胞的功能障碍及对脂质过氧化有抑制作用。本研究以养心菜为原料,采用响应面法获得养心菜总黄酮的最佳提取条件,选取最佳提取工艺方案提取的养心菜总黄酮,以抗坏血酸（Vc）做阳性对照,进行二苯代苦味肼基自由基（DPPH·）、羟自由基（·OH）、2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐阳离子自由基（ABTS+·）清除率试验以及总抗氧化能力和还原力测定,分析其抗氧化活性。随后进行动物试验,对STZ诱导的Ⅰ型糖尿病模型C57BL/6小鼠进行连续7周的灌胃给药试验,测定总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、糖化血红蛋白（GHb）、丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、过氧化氢酶（CAT）生化指标。苏木精-伊红染色观察肝脏组织病变。蛋白质免疫印迹试验测定转录因子核因子E2（Nrf2）、Kelch样ECH关联蛋白1（Keap1）、血红素加氧酶-1（HO-1）和NADPH-醌氧化还原酶-1（NQO1）的表达水平。结果表明:1.经响应面优化后,最佳提取条件为:乙醇浓度91%,液料比47:1 m L/g,提取温度78℃,提取时间3.55 h,此工艺条件下的养心菜总黄酮含量为25.03±0.08 mg/g。2.养心菜总黄酮显示出对DPPH·、ABTS+·和羟自由基有清除能力,同时具有较好的还原能力,但都弱于Vc。3.与空白组相比,养心菜总黄酮显著减轻了Ⅰ型糖尿病小鼠“三多一少”的症状,能够有效降低糖尿病小鼠的TC、TG及GHb含量（P＜0.05）。同时,养心菜总黄酮干预可以提高抗氧化应激相关指标T-SOD、GSH、CAT含量（P＜0.05）,降低MDA含量（P＜0.05）,减少体内自由基产生,从而加强机体抗氧化能力。4.HE染色结果发现糖尿病模型组小鼠肝脏组织中细胞界限不清,一些细胞核萎缩或溶解消失,肝脏受到损伤。经养心菜总黄酮干预后肝脏组织中有少量颗粒变性,肝索排列较整齐,肝损伤减轻。5.蛋白质免疫印迹试验结果表明,养心菜总黄酮通过上调Nrf2蛋白表达,并下调其负调节因子Keap1蛋白表达,进而调控Nrf2的下游靶标HO-1和NQO1,使其蛋白表达量上升,从而维持机体内环境稳态,减轻糖尿病所导致的机体氧化应激,从而缓解糖尿病症状。本文的研究结果为养心菜在辅助降血糖功能食品开发及养心菜改善糖尿病氧化应激症状的应用方面提供了理论参考。
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