代谢组学分析方法研究及其在冠心病和冠心病合并2型糖尿病中的应用

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血浆中的代谢物种类繁多,性质差异大、含量差异大。本研究以冠心病和冠心病合并2型糖尿病患者的血浆样本为研究对象,建立了代谢组学高分辨质谱数据前处理流程,筛选出血浆代谢物分析的最优溶剂组合。在此基础上,比较健康人与冠心病及冠心病合并2型糖尿病患者之间的代谢差异,对冠心病及冠心病合并2型糖尿病血浆代谢特征进行研究。主要研究内容如下:1.代谢组学高分辨质谱数据前处理方法研究分析代谢组学高分辨质谱数据中噪声的特点,建立代谢组学高分辨质谱数据前处理流程,包括MZmine2.38处理,匹配人类代谢组学数据库,扣除溶剂空白,扣除多次出现的质谱峰四个部分。将本研究所建立的数据前处理流程应用于两组代谢物混合标准品数据,其中数据1扣除了97.40%噪声,数据2扣除了96.56%的噪声。2.不同溶剂组合前处理对血浆代谢物覆盖面的影响研究选用了15种不同的溶剂组合对血浆样本进行前处理,使用代谢组学高分辨质谱数据前处理流程对数据进行过滤,依据血浆中一级质谱特征和二级质谱特征数量,以及血浆代谢物定性的数量,确定血浆代谢物提取的最优溶剂组合为:沉淀蛋白试剂:甲醇,复溶试剂:甲醇。3.冠心病及冠心病合并2型糖尿病患者代谢特征研究采用超高效液相色谱-四极杆-轨道阱质谱联用技术开展冠心病及冠心病合并2型糖尿病患者的血浆代谢组学研究,探寻冠心病及冠心病合并2型糖尿病患者的代谢特征。共鉴定出78种血浆内源性代谢物。筛选出20种区分健康人和冠心病患者的特征代谢物,35种区分冠心病及冠心病合并2型糖尿病患者的特征代谢物,37种区分健康人和冠心病合并2型糖尿病患者的特征代谢物。代谢通路分析结果表明,氨基酸代谢在这两类患者的生理代谢中起着重要作用,而脂肪酸代谢很可能与冠心病合并2型糖尿病相关。
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