[目 的]随着中国老龄化社会的到来、免疫抑制剂广泛应用以及艾滋病发病人数不断增多,腺病毒引起的病毒性肺炎的发病率在不断升高。目前尚无安全可靠的新型药物用于治疗腺病毒感染性疾病,并且人们对病毒引起的持续性感染机制仍然不清楚,很大原因是缺乏用于研究体内HAdV持久性感染的动物模型。树鼩与啮齿类动物相比,其进化关系与灵长类动物更近,已证实树鼩可以感染乙肝病毒、结核杆菌、EV71、H1N1等病原微生物,非常适合作为研究病原微生物感染的实验动物。我们前期研究中从树鼩肺组织中分离得到树鼩腺病毒昆明分离株(tree shrew adenovirus Kunmingstrain,TAV-KM),与人腺病毒基因组接近,那么树鼩能否作为腺病毒感染动物模型是值得探索的。本文将对TAV-KM体内外感染特性进行研究,并且利用人3型腺病毒(human adenovirus type 3,HAdV-3)、人7型腺病毒(humanadenovirustype7,HAdV-7)进行树鼩体内感染实验,了解不同病毒在树鼩体内的感染情况以及肺组织中细胞因子白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的表达变化,对树鼩腺病毒感染模型进行初步探索。[方 法]实验测定TAV-KM在A549上的最适MOI值,并以此参考值用TAV-KM分别感染TKC、树鼩肺成纤维细胞、A549、H1299、Vero、TC-1不同来源的细胞,绘制TAV-KM在不同细胞上的一步生长曲线。观察TAV-KM感染TKC、A549、H1299后的细胞病变情况。TAV-KM、HAdV-3、HAdV-7通过滴鼻的途径感染树鼩,对照组滴入等体积生理盐水,每组4只。检测病毒感染后树鼩肛温变化以及血液、粪便、不同组织器官的病毒载量水平。组织病理检查采用石蜡切片HE染色的方法,腺病毒hexon蛋白检测采用免疫组织化学染色的方法,采用相对荧光定量PCR对肺组织IL-10、IFN-γ的表达量进行检测。[结 果]体外实验结果显示,TAV-KM感染A549的最适MOI值为0.5。TAV-KM除了可以感染树鼩源TKC、肺成纤维细胞外,还可以感染人细胞系A549、H1299,并且在细胞中可以大量复制增殖,而在Vero、TC-1细胞系中,虽然可以完成入胞过程,但未表现出较强的增殖能力。TAV-KM感染TKC 24 h即可观察到TKC聚集成不规则的葡萄串状,呈典型腺病毒CPE表现。而TAV-KM感染A549、H1299未观测到腺病毒典型CPE。体内实验结果表明,TAV-KM、HAdV-3、HAdV-7感染树鼩10d后,大体解剖均可见的肺部充血。HE染色结果可见肺淤血、淋巴细胞浸润。实验组肺组织hexon蛋白免疫组化结果阳性。TAV-KM组气管在第14天的实验周期中均可检测到病毒载量,肺组织中第6天、10天可检测到病毒载量,粪便从第2天到第12天可检测到病毒载量,血液未检出;HAdV-3组于第2天、6天气管组织及第2天、10天肺组织中检测到病毒载量,粪便、血液均未检出病毒载量;HAdV-7组只在10d的肺组织中检测到病毒载量,其余样本均未检出病毒载量。与对照组相比,HAdV-3组、HAdV-7组IL-10、IFN-γ早期表达升高,14d恢复正常水平。TAV-KM组第14天IL-10仍处于较高水平,IFN-γ水平与前期相比有所降低。[结 论]体内体外实验表明,树鼩是潜在TAV-KM、HAdV-3、HAdV-7感染致病毒性肺炎的实验动物,TAV-KM可用于腺病毒树鼩模型的研究,是一种潜在的人兽共患病原。