毒素是植物病原物的次生代谢产物,在病原物致病过程中有重要作用。研究毒素能够进一步明确病原物致病因子,探明寄主植物的病理变化,为解析病原物的致病机理提供依据。灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是重要的植物病原真菌,在液体培养时可以产生毒素。病菌培养滤液经三氯甲烷萃取后旋转蒸发,可得到粗毒素。对粗毒素进行生物活性检测,发现粗毒素在番茄叶片上能产生与病菌接种的病斑相似的症状;可以显著抑制胚根的生长;并能够导致番茄幼苗失水萎焉。因此灰葡萄孢毒素对番茄植株具有明显的毒害作用。本试验从培养液种类、培养时间、培养温度、培养液pH值、光照条件、振荡条件等角度研究了影响病菌产毒的因子。明确了病菌最佳产毒的培养条件是:培养液为改良FriesⅢ号培养液,培养液pH值为6左右,培养温度为20～25℃,培养时间为20～25d,培养过程中不需要光照和振荡。灰葡萄孢粗毒素对番茄叶片细胞膜有明显的损伤作用。毒素处理后,细胞膜透性改变,细胞内电解质外漏。当毒素稀释50倍时,对细胞膜的损伤率达90%以上;稀释至200倍时,对细胞膜的损伤率仍达到39.13%。毒素处理叶片1h时,细胞膜透性就产生变化,损伤率达10%以上,处理时间越长,对细胞膜损伤越严重。番茄叶片经毒素处理后用电镜观察,结果表明,灰葡萄孢粗毒素对番茄叶片超微结构具有明显的破坏作用。毒素可以导致叶片细胞质壁分离,细胞膜断裂,液泡消失,叶绿体片层肿胀、结构紊乱,线粒体嵴模糊、消失,细胞器消失,细胞完全崩解等现象。毒素稀释至200倍时,对叶片细胞的超微结构仍具有破坏作用。用毒素处理3h时,细胞就出现中毒现象,12h时破坏程度加重,细胞器消失,细胞完全瓦解。