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目的探讨鳖甲煎丸不同提取物对TGFβ1诱导的HSC-T6细胞增殖及相关细胞因子的影响作用,并探究水提物与醇提物抗肝纤维化作用的异同。方法建立TGFβ1诱导HSC-T6纲胞增殖模型,以秋水仙碱作为阳性对照,细胞分为空白对照组、秋水仙碱组,水提物组和醇提物组,采用MTT法观察水提物与醇提物对HSC-T6细胞增殖的量效和时效关系来探讨鳖甲煎丸提取物对TGFpl诱导HSC-T6细胞增殖的影响;采用RT-PCR技术测定鳖甲煎丸提取物对HSC-T6细胞COL-Ⅲ、COL-IV,a-SMA、 CTGF、 PDGF mRNA含量的影响;采用ELISA法检测鳖甲煎丸提取物对HSC-T6细胞上清液COL-Ⅲ、COL-Ⅳ、 a-SMA、 CTGF、 PDGF蛋白的影响。结果1、MTT法检测结果表明,在无血清培养基条件下以5ng/ml浓度TGFβ1刺激HSC-T6细胞24h,可显著促进HSC-T6细胞增殖(P<0.05),鳖甲煎丸水提物与醇提物对TGFβ1诱导的HSC-T6细胞增殖均有一定的抑制作用,但其抑制作用表现有一定差异。水提物在浓度0.125mg/ml作用24h抑制作用最佳(P<0.05),并在0.125-2.000mg/ml浓度范围,抑制效果随剂量增加而降低,呈线性负相关关系,相关系数为0.8768。而醇提物在0.125-2.000mg/ml浓度范围并没有表现出明显的剂量依赖性,但表现出一定的时间依赖性。2、 RT-PCR结果显示与空白对照组比较,模型组a-SMA、 COL-Ⅲ、 COL-IV、 CTGF、PDGF mRNA含量均增高。与模型组比较,鳖甲煎丸水提物使HSC-T6细胞COL-Ⅲ、 COL-IV、 PDGF mRNA含量降低。醇提物使HSC-T6细胞COL-Ⅲ、 COL-IV mRNA含量降低,而PDGF mRNA含量升高。3. ELISA结果显示与模型组比较,鳖甲煎丸水提物可抑制HSC-T6细胞COL-Ⅲ、 COL-Ⅳ、 PDGF的表达。醇提物抑制HSC-T6细胞COL-Ⅲ COL-Ⅳ的表达,而促进PDGF的表达。结论1、以5ng/ml浓度无血清TGFβ1刺激HSC-T6细胞24h,可建立稳定的HSC活化细胞模型。2、鳖甲煎丸水提物和醇提物对TGFβ1诱导的HSC-T6细胞增殖均有一定的抑制作用,并且水提物在0.125-2.000mg/ml浓度范围,抑制效果随剂量增加而降低,呈线性负相关关系,醇提物对细胞增殖的抑制作用则表现出一定的时间依赖性,其抑制作用随时间的延长而增强。3、结合RT-PCR和ELISA结果可知,水提物与醇提物均可抑制胶原COL-Ⅲ、 COL-IV的合成。水提物可能通过抑制PDGF表达而抑制细胞增殖,而醇提物则可能促进PDGF表达而抑制细胞增殖。