CTC-WBC簇对肝癌的预后意义及其与CTC-DNA基因组改变的相关性分析

来源 :南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuchuanmiao
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背景:循环肿瘤细胞(Circulating tumor cell,CTC)是肿瘤转移的先兆,并偶尔在血液中与免疫细胞(如白细胞(WBC))聚集在一起而被发现。与CTC相关的WBC(CTC-WBC)簇可以促进CTC增殖和转移,这表明在外周血中发现CTC-WBC簇的患者可能预后较差。然而,尚不清楚CTC-WBC簇与肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)的相关性。同时,液体活检作为一种实时监测肿瘤时空异质性的方法引起了人们的关注,具有良好的临床应用前景。本研究我们探索了一种新型的CTC富集技术,可富集到外周血中的CTC-WBC簇,并分析了 CTC-WBC簇与HCC预后的关系(第二章),同时与二代测序相结合,分析了 HCC患者CTC-DNA的基因组改变与CTC-WBC簇计数之间的相关性(第三章)。方法:采用CanPatrolTM平台分离和计数外周血CTC和CTC-WBC簇,使用定制的panel进行DNA测序。第二章研究中收集了 2014年1月至2016年12月在南方医科大学珠江医院诊治的214例HCC患者的样本。卡方分析用于计算CTC-WBC簇与临床病理特征之间的相关性。Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析评估患者的预后。第三章研究中收集了 2016年1月至2019年12月南方医科大学珠江医院诊治的29例HCC患者的样本。Mann-Whitney U检验分析间充质CTC,CTC-WBC簇与特定基因组变化之间的相关性。结果:第二章研究中结果显示CTC-WBC簇和肿瘤大小(P=0.001)、肿瘤数目(P=0.005)、门静脉癌栓(P=0.026)、BCLC 分期(P<0.001)、AFP水平(P=0.002)、和 CTC 总数(P<0.001)在具有相关性。CTC-WBC 簇是 DFS(HR=1.951,95%CI;1.348-2.824,P<0.001)和 OS(HR=3.026,95%CI:1.906-4.802,P<0.001)的独立预后因素。Kaplan-Meier分析发现CTC-WBC簇阳性组的DFS和OS明显短于CTC-WBC簇阴性组(分别为P<0.001和P<0.001)。第三章研究中29名测序患者,每位患者至少检测到一个体细胞热点突变。肿瘤组织中检测到42个体细胞热点突变,CTC-DNA中检测到39个突变,均包括PTEN,MET,EGFR,RET和FGFR3。CTC-WBC簇的数目与RET的基因组改变呈正相关(P=0.01,Mann-Whitney U检验),与FGFR3的基因组改变呈负相关(P=0.039,Mann-Whitney U检验)。结论:1.外周血CTC-WBC簇是HCC的独立预测因子,它们的存在表明HCC患者的预后较差。2.我们报告了结合二代测序分析遗传变异的CTC富集平台的新方法,发现HCC患者外周血CTC-WBC簇的数量与特定的基因组谱有关。
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