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背景子宫内膜癌是世界女性生殖系统高发的恶性肿瘤之一,传统上采用手术治疗、化疗等治疗方案,化疗的副作用、药物的耐药性使临床应用受到很大限制。近年来,从中医药中寻找新的治疗药物成为研究的热点。在临床上大黄具有泻下、抗病毒、护肝等作用。大黄的游离单蒽醌类化合物的主要有效成分包括大黄素、大黄酸、大黄素甲醚和芦荟大黄素等。随着不断深入研究芦荟大黄素在抗癌方面表现出较强的作用。大量研究表明,芦荟大黄素可诱导多种肿瘤细胞的凋亡,但是对HEC-1-B的作用的研究报道较少。目的研究芦荟大黄素(Aloe emodin)对人子宫内膜癌(HEC-1-B)细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响,深入探讨芦荟大黄素对HEC-1-B细胞干扰的作用机制。方法将体外培养的HEC-1-B采用随机“数字表”随机分成5组:对照组、芦荟大黄素Ⅰ、芦荟大黄素Ⅱ、芦荟大黄素Ⅲ、芦荟大黄素Ⅳ。在外在条件相同的基础下,分别给予不同浓度的芦荟大黄素(0、20、40、80、160)μmol/L培养48h[1]。采用MTT法和Western blot法测定芦荟大黄素增殖效应;同时采用FCM进行细胞周期分布及凋亡率的分析;Hoechst33258荧光染色观察HEC-1-B细胞形态学的变化。用SPSS19.0统计学软件对检测结果进行统计学分析。结果1芦荟大黄素对HEC-1-B细胞增殖的影响(1)MTT实验结果显示,对照组的吸光度(OD值)明显高于20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L的芦荟大黄素组(P<0.01),且在该浓度范围内呈剂量依赖性。提示芦荟大黄素可抑制HEC-1-B细胞的增殖。(2)Western blot实验结果显示,与对照组比较,20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L的芦荟大黄素组作用48h后,PCNA蛋白表达随药物浓度的增加而逐渐减弱(P<0.01),呈剂量依赖性。提示芦荟大黄素可抑制HEC-1-B细胞内PCNA蛋白的表达。2 HEC-1-B细胞周期和凋亡的检测(1)细胞周期检测结果显示,与对照组比较,芦荟大黄素对HEC-1-B细胞周期干扰48h后,将HEC-1-B细胞周期阻滞在G2/M期(P<0.01),且在一定浓度(20~160)μmol/L范围内,G2/M期的比例随芦荟大黄素浓度的增加而增加,呈剂量依赖性。提示芦荟大黄素可抑制其细胞周期的进展。(2)细胞凋亡检测结果显示,芦荟大黄素各组HEC-1-B细胞的凋亡率与对照组比较,明显增加(P<0.01),且在一定浓度(20~160)μmol/L范围内呈剂量依赖性。荧光染色可观察到对照组细胞形态规则,而芦荟大黄素各组细胞呈核碎裂、核固缩、荧光强度增强等凋亡特征。提示芦荟大黄素可诱导HEC-1-B细胞凋亡。结论在一定浓度(20~160)μmol/L范围内芦荟大黄素可抑制体外培养的HEC-1-B细胞增殖,阻止细胞周期进展,诱导细胞凋亡。这可能是芦荟大黄素对HEC-1-B细胞作用的机制之一。