本文以云南典型初烤烟叶为原料,烟叶精油提取率为考察指标,优化了超临界CO₂萃取烟叶精油的工艺条件,比较了云南不同地区新鲜烟叶中挥发油成分的提取率;采用超声辅助、索式、溶剂萃取方法对初烤烟叶中有效成分进行提取研究;分析比较了四种萃取方法在最佳条件下的初提物组成,继而以烟碱和新植二烯为目标,以初提物为原料,研究了一种简单且高效的分离纯化烟碱和新植二烯的方法。主要研究内容如下:1.采用超临界CO₂萃取初烤烟叶精油成分,以烟叶精油得率为指标,选出最佳提取工艺:萃取压力25MPa、萃取温度50℃、CO₂流量20g/min、萃取时间2h,且各因素对烟叶精油得率的影响大小为:萃取温度>萃取时间>萃取压力>CO₂流量,此条件下平均得油率3.18%。使用气质联用仪（GC-MS）分析最佳萃取条件下得到的挥发油,结果表明:烟油中主要成分为（S）-3-（1-甲基-2-吡咯烷基）-吡啶（烟碱）、新植二烯、（Z,Z,Z）-9,12,15-十八碳三烯酸、正十六烷酸、维生素E（生育酚）、1,5,9-三甲基-12-（1-甲基乙基）-4,8,13-环十二碳三烯-1,3-二醇等。2.借鉴初烤烟叶最佳萃取条件,对云南不同地区不同部位的新鲜烟叶进行超临界CO₂萃取,并比较其得率大小,结果表明:通海地区中部新鲜烟叶的得率较高,且萃取物颜色偏黄;其他地区萃取物得率较低;且颜色均比较浅。新鲜烟叶萃取物的GC-MS分析结果显示,其主要成分为烟碱、戊酸5-羟基-2,4-二叔丁基苯基酯、2-己基-1-癸醇等,与初烤烟叶萃取物中的主要成分差异较大。3.对初烤烟叶进行超声辅助萃取、索式萃取和溶剂萃取,并比较了不同浓度乙醇水溶液为萃取剂时,其烟叶初提物的得率和主要成分,结果显示,当萃取剂或夹带剂为100%乙醇时,索式萃取下初提物的得率最高,四种萃取工艺的得率顺序为:索式萃取>超声辅助萃取>溶剂萃取>超临界CO₂萃取。4.优化了以烟碱和新植二烯为主的气相色谱-质谱（GC-MS）分析条件。5.以烟碱和新植二烯为目标分离物,选择适宜的萃取方法,并以萃取获得的初提物为原料,采用溶剂反向萃取法和柱层析法对初提物中的烟碱和新植二烯分离纯化。结果表明:有机溶剂反萃超临界初提物中的烟碱和新植二烯,所得产品中新植二烯含量达到97.99%,得率为21.34%;有机溶剂反萃超声辅助初提物,所得产品中烟碱含量为63.24%,新植二烯含量33.53%,产品总得率为17.76%;有机溶剂反萃溶剂萃取初提物,所得产品中新植二烯纯度为67.34%,得率为8.76%;当采用柱层析法洗脱超临界初提物,分离纯化得到的产品中新植二烯含量达到75.11%,得率为25.1%。