【摘 要】
：
围产期奶山羊由于胎儿生长、产道收缩和形成初乳需要消耗大量钙离子,因此血液中钙离子浓度迅速降低,使围产期的奶山羊极易发生低血钙症,进而引发产后瘫痪、乳腺炎、酮病、胎衣不下等疾病。5-羟色胺(5-hydorxytyrptamine,5-HT)可以动员骨骼中的钙释放到血液中,进而平衡围产期奶山羊体内的钙稳态。乳腺上皮细胞的钙代谢和凋亡对奶山羊的泌乳性能有至关重要的影响,但5-HT调控山羊乳腺上皮细胞钙代
论文部分内容阅读
围产期奶山羊由于胎儿生长、产道收缩和形成初乳需要消耗大量钙离子,因此血液中钙离子浓度迅速降低,使围产期的奶山羊极易发生低血钙症,进而引发产后瘫痪、乳腺炎、酮病、胎衣不下等疾病。5-羟色胺(5-hydorxytyrptamine,5-HT)可以动员骨骼中的钙释放到血液中,进而平衡围产期奶山羊体内的钙稳态。乳腺上皮细胞的钙代谢和凋亡对奶山羊的泌乳性能有至关重要的影响,但5-HT调控山羊乳腺上皮细胞钙代谢和凋亡的分子机制尚不明确。本研究通过给围产期奶山羊注射5-羟色氨酸(5-HTP,5-hydroxytryptophan),提高奶山羊体内的5-HT浓度,对分娩当天的血液进行全转录组测序分析,筛选出受5-HT浓度正调控并且与钙代谢和细胞凋亡相关的基因,并在山羊乳腺上皮细胞中进行功能验证,研究获得主要结果如下:1.围产期注射5-HTP奶山羊的血液全转录组分析通过在预产期前7天每天给奶山羊按体重(0.8 mg/kg)静脉注射5-HTP(处理组)或生理盐水(对照组),采集分娩当天血液样本进行全转录组测序分析,筛选到受5-HT调控的差异表达的基因999个、LncRNA 967个、Circ RNA 95个、micro RNA 87个。通过功能注释和富集分析发现这些差异表达基因和转录本主要影响钙代谢、脂代谢、免疫反应、细胞增殖和细胞凋亡等生理过程。根据竞争内源性RNA(Competition Endogeno us RNA,ce RNA)作用机制,利用Cytoscape3.6.1构建了LncRNA/Circ RNA-micro RNAm RNA调控网络,并对网络中的差异表达基因作富集分析,结果发现有3个与钙代谢相关的基因,分别是Toll样受体9(Toll Like Receptor 9,TLR9)、缝隙连接蛋白γ2(Ga p Junction Protein Gamma 2,GJC2)和连接素1(Junctophilin1,JPH1)。具体的调控关系为LncRNA MSTRG.101405.3和MSTRG.63774.3都可以分别与JPH1和GJC2竞争性地结合micro RNA NC＿030814.1＿19917,进而调控JPH1和GJC2的表达,LncRNA MST RG.1354.2可以TLR9竞争性地结合micro RNA NC＿030825.1＿46027,进而调控TLR9的表达。2.ATF3对山羊乳腺上皮细胞钙离子浓度和细胞凋亡的影响研究围产期注射5-HTP奶山羊的血液转录组分析得到受5-HT调控的差异表达基因999个,结合分析GEO数据库中注射5-HTP的小鼠乳腺转录组测序数据,筛选出受5-HT浓度正调控的ATF3基因,并在山羊乳腺上皮细胞中对其功能进行验证。用5-HTP处理山羊乳腺上皮细胞后,RT-q PCR检测ATF3和钙代谢相关基因的表达变化,荧光染料检测细胞内钙离子浓度变化。结果发现5-HTP处理山羊乳腺上皮细胞后ATF3的表达量升高(p<0.001),这与小鼠和山羊的转录组测序分析结果一致。5-HTP处理山羊乳腺上皮细胞后细胞内的钙离子浓度降低(p<0.05),细胞内与钙代谢相关的基因表达也发生变化,其中SPCA1的表达升高(p<0.001),SPCA2和SERCA2的表达降低(p<0.001)。山羊乳腺上皮细胞中过表达/干扰ATF3后,检测细胞内钙离子浓度变化和凋亡情况,发现ATF3可以降低细胞内的钙离子浓度,并促进山羊乳腺上皮细胞凋亡。以上研究表明,奶山羊产前注射5-HTP使体内血液中5-HT浓度升高,分娩当天血液全转录组测序分析发现5-HT主要影响钙代谢、脂代谢、细胞增殖、细胞凋亡、免疫反应等生理过程。在ce RNA调控网络中发现TLR9、GJC2和JPH1基因与钙代谢相关,在离体培养的山羊乳腺上皮细胞中,5-HT可通过促进ATF3的表达降低细胞内的钙离子浓度,并促进山羊乳腺上皮细胞凋亡。
其他文献
目的:观察真武汤加减治疗左室射血分数降低的慢性心衰患者(阳气亏虚型)的临床疗效。方法:采用随机对照的研究方法,收集符合左室射血分数降低的慢性心衰诊断标准的患者,中医辨证为阳气亏虚型,随机分为对照组和治疗组;两组均使用慢性心衰的西药规范治疗,在此基础上治疗组加用真武汤加减治疗,用药3个月后疗程结束。观察治疗前后患者中医证候积分、中医证候疗效、明尼苏达心力衰竭生活质量评分、纽约心脏病协会(NYHA)心
随着信息技术的高速发展,卫星导航系统已成为当今世界最具前沿的高科技应用发展领域之一,其在军事、民用及科学研究等领域均得到了广泛地应用。我国高度重视对卫星导航的研究与建设,自2000年起,研究人员开始逐步创建我们自主研发的全球卫星导航系统——中国北斗卫星导航系统,并对其卫星导航技术展开深入研究。目前,北斗卫星导航系统已顺利应用于工程勘测、汽车导航和社会安全等众多领域,其在公共安全及经济利益方面也创造
生物胺(biogenic amines)通常是氨基酸在脱羧酶的作用下,形成的一类含氮有机化合物的总称,其代表物质主要有腐胺、尸胺、组胺、精胺、酪胺、亚精胺等。生物胺在食品中存在比较普遍,尤其是蛋白质和氨基酸含量较高以及各类发酵食品,如畜禽与水产肉类食品、乳制品以及酒、腌菜等类发酵食品。少量生物胺是人和其他生物体体内正常的具有生理作用的活性物质,但是过量的生物胺可能影响食品的风味,甚至会对人体和其他
圆锥破碎机是矿山破磨设备中的关键设备之一,主要应用于矿石的中、细碎阶段。随着对破碎产品生产效率和质量要求的不断提高,对圆锥破碎机的性能要求也越来越高。当下主流使用的圆锥破碎机常见问题是破碎腔内衬板使用寿命较短、结构参数与腔型匹配性差、生产率的理论计算不准确等。因此本文以圆锥破碎机为研究对象,基于岩石破碎理论,对圆锥破碎机进行运动学与动力学分析;通过理论计算研究与离散元法仿真验证结合的方法,改进了圆
分期付款买卖是一种典型的信用交易,其是指双方当事人在合同中约定,由出卖人先交付标的物、买受人分次支付合同总价款的一种特殊买卖。我国现有立法中,唯有《合同法》第167条直接规制分期付款买卖,但理论界就该条所规定的分期付款买卖合同解除问题研究甚少。最高人民法院第67号指导案例便涉及股权转让合同能否适用《合同法》第167条行使分期付款合同解除权的问题;其试图确立分期付款股权转让合同中出让人主张合同解除的
目的:对比分析腹腔镜胰十二指肠切除术与开腹胰十二指肠切除术的文献资料,评估腹腔镜胰十二指肠切除术的可行性和优越性。方法:在Pub Med,Web of Science和Cochrane Central
研究目的:探讨特发性正常压力脑积水（idiopathic normal pressure hydrocephalus,iNPH）及脑微出血（Cerebral microbleeds,CMBs）的发病机制、影像学特征、诊断标准等研究进展情况
轨道交通列车由城市轨道交通牵引供电系统进行供电,当供电系统发生意外时,直流牵引供电网无法提供电能给轨道交通列车,宽范围输入的双向DC/DC变换器(Bidirectional DC/DC Converters,BDC)可以应用于这种意外状况。输入串联输出并联(Input-Series Output-Parallel,ISOP)的组合变换器适用于高电压输入、低电压输出的场合,Buck/Boost-CL
瓜子金为远志科远志属草本植物瓜子金(Polygala japonica Houtt.)的全草,又名金钥匙、小远志等,分布于我国南方各省。瓜子金化学成分以皂苷、黄酮类化合物为主,药理作用主要为抗炎镇痛作用,临床多以复方入药为主,常配大青叶、野菊花等组成复方瓜子金颗粒、金宏声颗粒,多用于治疗上呼吸道感染疾病。瓜子金与公认的治疗痴呆的中药远志为同科、同属植物,二者在植物基源,古今文献记载,民间用药习俗,
壮族是酷爱唱歌的民族。壮族山歌多姿多彩,可以称得上是壮族传统文化当中一张闪亮的名片。农事歌是壮族山歌的重要组成部分,它对于农业活动具有明确的指导作用,同时也反映了人、自然、生产三者之间的关系。本文以《马山壮族农事组歌》歌本为研究对象,在整理文本的基础上再造文献,从语言和文化两个角度探讨文本的价值。文章将从以下几方面展开论述:首先回顾国内外关于方块壮字和壮族农事歌谣的研究成果,并指出本研究的目的、意