特应性皮炎皮肤S100A11蛋白表达对皮肤屏障功能的影响

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目的建立符合特应性皮炎(Atopic dermatitis,AD)的BALB/c小鼠模型,对小鼠模型的皮损部S100A11蛋白的表达情况进行检测分析,同时检测该小鼠模型血清中IL-6、IL-4及IgE的浓度。探讨特应性皮炎皮肤屏障功能障碍时S100A11蛋白的表达情况及血清中IL6、IL-4及IgE的浓度变化。方法实验选用SPF级重量为20±2g的纯系雌性BALB/c小鼠40只,周龄为6-8周。随机分为2组(AD组及正常组),各20只。实验开始前7天对小鼠背部脱毛,选用8%的硫化钠淀粉溶液为脱毛试剂,脱毛面积约8cm2。AD组建模方法为:实验第1天,小鼠背部脱毛处涂抹0.5%DNFB致敏剂l00μl,第2-6天不进行任何处理,第7-35天期间每周涂抹致敏剂2次,每次70μl,共9次。正常组涂抹不含DNFB的丙酮/橄榄油溶液,每次涂抹的剂量、时间同AD组。建模后,使用乙醚将小鼠麻醉,对AD组及正常对照组小鼠进行摘除右侧眼球取血,室温静置30min后离心并提取上清液,测定血清中IL-6、IL-4及IgE的浓度。取小鼠背部皮损处组织,进行HE染色及S100A11的蛋白含量测定。结果1.小鼠皮肤炎症程度评分比较:AD组皮肤炎症评分(8.00)高于对照组(0.00),差异有统计学意义(P<0.05)。2.病理HE染色结果:正常组小鼠组织正常,未见炎症细胞浸润。AD组小鼠致敏部皮肤可见表皮及真皮层增厚,部分真皮层可见纤维组织增加,可见大量炎症细胞浸润。3.脾指数统计结果:AD组小鼠脾指数(2.08±0.22),正常组(1.72±0.13),AD组明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.搔抓次数统计结果:AD组小鼠搔抓次数(14.29±1.77),正常组(1.19±0.92),AD组明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05).5.ELISA检测结果:AD组血清IL-6(97.64±4.59)pg/ml,正常组(64.80±3.23)pg/ml;AD 组血清 IL-4(84.66±3.85)pg/ml,正常组(49.32± 3.12)pg/ml;AD 组血清 IgE(17.63±4.11)μg/ml,正常组(10.40±2.39)μg/ml;以上结果AD组均明显高于正常组,经统计学分析,均有统计学意义(P<0.05);IL-6与AD炎症程度间相关系数为0.588,为正相关(P<0.01)。6.Western Blot检测结果:AD组的S100A11相对表达量低于于正常对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。7.S100A11相对表达量与血清总IL-4、IL-6的相关系数分别为-0.667和-0.809,均为负相关(P<0.01)。结论1.利用DNFB建立AD小鼠模型具有可行性。2.AD组血清IgE及IL-6、IL-4浓度显著高于正常组,IL-6与炎症程度成正相关,提示炎症反应参与DNFB所致小鼠AD的发病过程,IL-6可能成为AD炎症程度的新的指标。3.AD模型组的皮损处S100A11明显下降,而血清IL-4、IL-6明显上升,且S100A11与IL-4、IL-6有负相关性,提示S100A11缺乏可能是AD的发病过程中炎症反应的始动因素之一。
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