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目的 制备重组CFP-10蛋白和CFP10-ESAT6融合蛋白，评价其在结核病血清学诊断和皮试诊断中的应用价值。 方法 PCR扩增得到CFP-10、CFP10-ESAT6基因片断，将其分别克隆入pET-24b和pET-28a表达载体。优化表达条件、纯化重组CFP-10蛋白（rCFP-10）和CFP10-ESAT6蛋白（rCFP10-ESAT6）。建立以rCFP-10、rESAT-6、rCFP10-ESAT6为抗原的酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，检测结核患者血清和健康者血清中的抗体。建立豚鼠13种分枝杆菌致敏模型，PPD及三种重组蛋白皮肤轮圈试验，注射后24h、48h、72h测量DTH反应纵、横直径（cm）。 结果 重组质粒pET24b-CFP10、pET28a-CFP10-ESAT6靶基因测序结果与预计设计完全一致。两种重组蛋白在Ecoli BL21（DE3）工程菌中均为可溶性表达，表达量分别占菌体总蛋白的20％和40％。利用金属螯合亲和层析直接纯化重组蛋白，纯度达到90％以上。Western blot分析表明，重组蛋白能与结核患者血清发生特异性免疫结合反应，与健康者血清不发生反应。ELISA结果显示：rCFP-10的特异性和敏感度分别为100％和15.1％：rESAT-6分别为97％、18.2％；rCFP10-ESAT6分别为97％、36.4％。三种重组蛋白均可诱发H37Rv致敏豚鼠的DTH反应，其效力与PPD相似。在卡介苗（BCG）及其他多种分枝杆菌致敏豚鼠体内，诱发DTH反应的能力小于PPD，差别有显著性意义（P＜0.05）。 结论 pET24b-CFP10／BL21（DE3）、pET28a-CFP10-ESAT6／BL21（DE3）工程菌能高效表达CFP-10蛋白和CFP10-ESAT6融合蛋白，该重组蛋白具有较高的抗原特异性和免疫反应性，有可能成为结核病免疫学诊断的特异抗原。