侵袭性真菌感染,特别是白色念珠菌感染长久以来危害着人类的健康,严重时甚至会危及生命。由于药物作用靶标的单一性以及过高的药物使用频率,治疗念珠菌病的常用唑类药物如氟康唑等已出现了不同程度的耐药性。因此,寻找新的作用靶点及作用机制以开发新型抗唑类耐药菌的抑制剂至关重要。Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶（FBA-Ⅱ）是一种只存在于病原微生物（如真菌、细菌、蓝细菌等）及低等生物中的重要调控酶。基因敲除实验表明,FBA-Ⅱ对于白色念珠菌的生存至关重要。目前已报道的Ca-FBA的非共价抑制剂大多为底物类似物,并不具备体外活性。研究表明Ca-FBA具有3个非催化性质的半胱氨酸,因此设计其合理的靶向共价抑制剂为治疗白色念珠菌唑类耐药菌感染提供了另一种思路。为此,本文拟以苯并异硒（噻）唑酮类化合物为探针分子,系统研究了这类化合物对Ca-FBA的抑制活性及其构效关系,探究了它们的抑制机理,同时结合复合物晶体阐明了此类化合物对Ca-FBA的共价变构调控机制。主要研究内容如下:1、测试了苯并异硒（噻）唑酮类化合物对Ca-FBA的抑制活性,结果表明苯并异硒唑酮类化合物的效果优于苯并异噻唑酮类化合物的效果,化合物2a的半抑制浓度（IC50）为14.3 nM。以化合物2a及2b作为分子探针,结合定点突变实验、液相色谱—质谱联用实验（LC-MS实验）证明了此类化合物作用于Ca-FBA的新的共价位点C292。结构活性关系分析（SAR分析）表明,骨架结构中的苯环对于此类化合物的活性影响较大,如1a对Ca-FBA的活性无影响,而带有苯环的1b的抑制活性为241.5 nM,苯环上所连取代基的影响则较小。同时我们对此类化合物的结合常数（KI）以及动力学速率常数（kinact）进行了表征,数据显示其为高反应活性,低亲和力的共价抑制剂。2、通过晶体学手段探究了此类化合物对Ca-FBA的抑制机制,使用垂钓法成功获得了分辨率为2.35 （?）的Ca-FBA C157S突变体与2a4的复合物晶体（PDB ID:7V6G）。晶体结构显示,2a4与C292残基之间存在共价作用关系,并且其非共价部分与残基R345之间存在着π-π相互作用以及氢键相互作用。同时结合产物3-磷酸甘油（G3P）与Ca-FBA的共晶结构表明（PDB ID:7V6F）,L288和S268对于此类抑制剂对Ca-FBA的共价变构抑制至关重要。2a4与L288的排斥关系会使其偏离与S268相连的柔性环,进而影响产物G3P与S268之间的氢键作用,导致Ca-FBA的催化活性降低。体外抗真菌实验显示大部分的苯并异硒（噻）唑化合物都对103、7781和904等白色念珠菌唑类耐药菌株具有良好的抑制效果。2a11可以潜在地抑制唑类耐药菌株103的生长,抑制80%细菌生长的最低药物浓度（MIC80）为1 μg/mL,远低于商品化药物氟康唑。