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目的:1.分析小鼠肝脏缺血再灌注(Ischemia and reperfusion,I/R)动物模型中,肝脏组织内mi R-24-3p和STING表达水平的相关性;2.观察差异表达的mi R-24-3p对I/R体内模型中STING和IRF3相关蛋白表达、炎性因子分泌、肝脏组织病理学改变和肝功能损伤程度的影响;3.探讨mi R-24-3p参与STING-IRF3信号通路的调控作用以及影响肝脏缺血再灌注损伤(Ischemia and reperfusion injury,IRI)的分子机制。方法:分别采用C57BL/6J小鼠和RAW264.7细胞(枯否细胞(Kupffer cells,KCs)替代细胞株)建立肝I/R体内外模型。肝脏组织HE染色评估肝损伤,微板法检测造模后血清AST和ALT的水平,ELISA检测血清炎症因子TNF-α、IL-6的水平,TUNEL染色评估肝脏组织细胞凋亡情况,Target Scan数据库预测分析STING与mi R-24-3p的潜在结合位点,并采用荧光素酶报告基因实验验证STING是否为mi R-24-3p的靶基因,q RT-PCR检测肝组织mi R-24-3p和STING以及相关炎症因子的m RNA表达。Western-blot检测肝组织STING、p-IRF3和Caspase-1的蛋白表达,ELISA检测RAW细胞裂解液和细胞上清中IL-1β和IL-18的蛋白表达。结果:1.I1R3、I1R6、I1R9、I1R12与sham组相比STING、ALT、AST、TNF-α、IL-6的表达上调,mi R-24-3p的表达下调且随着再灌注的时间延长,上调及下调的幅度均逐渐增加。2.Pearson相关分析显示,I/R体内模型肝脏组织中mi R-24-3p与STING的表达量呈负相关(P<0.0001,r=-0.8706)。3.采用双荧光素酶报告基因实验证实了STING的3′-UTR区域与mi R-24-3p结合二者存在靶向调控关系。4.与I/R组相比,I/R+si STING1组和si STING2组的STING转录水平表达显著下调(P<0.001;P<0.001),与sham组相比I/R组STING、p-IRF3、TNF-α、IL-6、AST、ALT的表达显著上调(P<0.001;P<0.001;P<0.001;P<0.001;P<0.001;P<0.001),与I/R组相比,I/R+si STING组STING、p-IRF3、TNF-α、IL-6、AST、ALT的表达下调(P<0.01;P<0.01;P<0.001;P<0.001;P<0.001;P<0.001)。5.与I/R组相比I/R+Ago-mi R-24-3p mimics组肝脏中的mi R-24-3p表达显著升高(P<0.001),STING和p-IRF3的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01;P<0.01)小鼠血清中TNF-α、IL-6、AST、ALT的表达显著降低(P<0.001;P<0.001;P<0.001;P<0.001)肝脏组织损伤Suzuki′s评分降低,肝脏细胞凋亡减少,差异有统计学意义(P<0.001)。6.与Control组相比,肝I/R体外模型中mi R-24-3p表达显著下调,且随着缺氧和复氧时间的延长其表达量逐渐下降,与Control组相比,H/R处理后的ddwater组和NC组TNF-α、IL-6、STING的表达显著升高(P<0.001;P<0.001;P<0.01;P<0.01;P<0.05;P<0.05),与NC组相比,inhibitors组STING、IL-6、TNF-α的表达显著升高(P<0.0001;P<0.01;P<0.0001)mi R-24-3p的表达量显著降低(P<0.01)而mimics组STING、IL-6、TNF-α的表达量显著降低(P<0.05;P<0.05;P<0.05)mi R-24-3p的表达量显著升高(P<0.001),与NC组相比mimics组细胞中STING和p-IRF3的蛋白表达量显著降低(P<0.01)inhibitors组细胞中STING和p-IRF3的蛋白表达量显著升高(P<0.01)。7.肝I/R体外模型中,与NC组相比,si STING组STING、p-IRF3和Caspase-1的蛋白表达量显著降低(P<0.01;P<0.01;P<0.001)。肝I/R体外模型中,与NC组相比,inhibitors组STING、p-IRF3和Caspase-1的蛋白表达量以及RAW细胞裂解液和细胞上清中的IL-1β和IL-18均显著升高(P<0.001;P<0.01;P<0.01;P<0.001;P<0.001;P<0.001;P<0.001),与inhibitors组相比inhibitors+si STING组STING、p-IRF3和Caspase-1的蛋白表达量以及RAW细胞裂解液和细胞上清中的IL-1β和IL-18均显著降低(P<0.001;P<0.01;P<0.01;P<0.01;P<0.001;P<0.001;P<0.001)。结论:1.小鼠I/R模型中,肝组织内STING与mi R-24-3p的表达呈负相关。2.mi R-24-3p可以结合STING的3′-UTR区域,通过抑制体内外肝I/R模型中STING的表达从而负性调控肝IRI。3.mi R-24-3p可以通过抑制STING-IRF3信号通路从而减少炎症因子和炎症小体的释放,减少肝细胞凋亡,缓解肝缺血再灌注后的肝功能损伤。