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近年来国内外食品安全问题频发,由生物毒素污染引发的食品安全事件备受关注。例如近期我国食用油中黄曲霉毒素B1超标以及牛奶中黄曲霉毒素M1超标事件,严重影响到人民群众身体健康和社会稳定。黄曲霉毒素是一类剧毒、致突变、致畸、致癌的化合物,是目前为止发现的最强致癌物之一,其中污染农产品的黄曲霉毒素中以黄曲霉毒素B1(AFB1)含量最多,急性毒性和致癌性也最强。因此,建立快速、灵敏的检测方法一直是生物毒素研究的热点。量子点作为一种新型的荧光标记物具有激发光谱宽、发射光谱窄、光稳定性高等优良特性,具有非常广阔的应用前景,在荧光免疫分析方面应用越来越普遍。量子点荧光探针在AFB1检测领域的应用,将会为其它真菌毒素的检测方法研究奠定基础。本文利用微波辅助加热法一步直接合成一系列水溶性的谷胱甘肽包覆的CdTe量子点,优化其合成的条件,选择合适的量子点以备下一步偶联,所选的量子点为回流时间45min,pH10.5条件下微波合成,用紫外吸收光谱、荧光光谱以及高分辨透射电镜(HRTEM)进行表征,结果表明此时荧光强度最强,荧光量子产率最高,而且不对黄曲霉毒素自身的荧光产生影响;偶联所用的量子点具有优异的发光性能,直径约为2.6nm。通过复苏细胞株,腹水纯化等制备了纯度比较高的抗AFB1的单克隆抗体,首次将CdTe QDs与抗AFB1的单克隆抗体通过共价结合的方式偶联在一起,成功制备了针对AFB1的MAb-CdTeQDs荧光探针,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表明此偶联物具有量子点的荧光特性,通过传统的间接酶联免疫吸附法鉴定表明具有抗体的生物活性;将CdTe QDs与兔抗鼠二抗进行共价偶联,成功制备了二抗-CdTe QDs偶联物。在制备MAb-CdTe QDs偶联物的基础上,研究建立了一种直接竞争荧光免疫分析检测花生中的AFB1方法(dcFLISA),在花生基质中的半抑制浓度(IC50)为0.149ng/mL,最低检测限(LOD)为0.016ng/mL,检测线性范围为0.0411.753ng/mL,空白AFB1花生加标回收实验结果表明回收率在85.3117.3%之间,变异系数均小于10%。说明此方法符合AFB1分析要求,可以用于花生中AFB1的检测。利用二抗-CdTe QDs偶联物以及商品化的荧光物质FITC标记的二抗建立间接竞争荧光免疫分析方法(icFLISA),基于二抗-CdTe QDs的icFLISA在花生基质中的IC50为0.059ng/mL,而基于FITC标记的二抗的icFLISA在花生基质中的IC50为0.588ng/mL,回收率都在80120%之间,变异系数均小于10%。上述三种荧光免疫分析方法比较研究表明,三种方法均符合AFB1分析要求,可以用于花生中AFB1的检测,而基于MAb-CdTe QDs偶联物的dcFLISA所需时间最短、快速、特异性好,对花生实际样品的检测结果表明,与HPLC方法检测结果具有良好的一致性。