【摘 要】
：
目的：对已合成的谷胱甘肽敏感性近红外（NIR）纳米前药POEGMA-bP（CPT-CyOH）（PCC）,即喜树碱（CPT）和PCC中的NIR荧光团CyOH通过二硫键连接,进行体外、体内抗肿瘤性能探究。研究方法：1.PCC的物理化学性质分析:（1）PCC胶束的溶血实验。（2）高浓度GSH诱导肿瘤中CPT的释放环境。2.体外实验:（1）培养小鼠乳腺癌细胞（4T1）和人宫颈癌细胞（HeLa）。（2）MT
论文部分内容阅读
目的：对已合成的谷胱甘肽敏感性近红外（NIR）纳米前药POEGMA-bP（CPT-CyOH）（PCC）,即喜树碱（CPT）和PCC中的NIR荧光团CyOH通过二硫键连接,进行体外、体内抗肿瘤性能探究。研究方法：1.PCC的物理化学性质分析:（1）PCC胶束的溶血实验。（2）高浓度GSH诱导肿瘤中CPT的释放环境。2.体外实验:（1）培养小鼠乳腺癌细胞（4T1）和人宫颈癌细胞（HeLa）。（2）MTT法和活/死染色试验探究在加入PCC胶束的培养皿中,两种肿瘤细胞培育后的存活情况。（3）细胞荧光成像定量研究两种肿瘤细胞对PCC的摄取情况。（4）溶酶体和线粒体共定位研究药物进入肿瘤细胞的途径。（5）为模拟实体肿瘤,建立4T1多细胞球模型（MCSS）并探究PCC的药物渗透能力。3.体内实验:（1）建立荷瘤小鼠4T1模型。（2）用近红外成像系统获取已注射PCC胶束的小鼠解剖后肿瘤和器官的荧光图像,研究PCC在体内的分布情况。（3）设置对照组、游离CPT、PCC集团3个实验组,监测3组小鼠体重、肿瘤体积及重量等指标,进行主要器官切片H＆E染色,肿瘤H＆E、TUNEL和DAPI染色,探究PCC在体内抗肿瘤作用效果。（4）血液分析仪（迈瑞BC-2600-Vet）对小鼠进行血常规分析,评估纳米前体药物的生物安全性。结果：1.PCC的物理化学性质分析:（1）PCC溶血率小于4%,表明PCC具有良好的血液相容性。（2）在PBS（pH=7.4）中,CPT几乎不释放,当缓冲液中GSH浓度达到2mmol/L时,48h内CPT释放率达到71.7%,CPT几乎以恒定速率释放,CPT浓度随时间增加。药物释放研究证明,GSH敏感性PCC胶束是一个良好的药物释放控制系统。2.体外细胞实验:（1）MTT法显示24hPCC组的4T1细胞存活率49.8%、Hela细胞存活率21.4%,活/死染色实验显示24h PCC组细胞数量明显减少。（2）流式细胞仪测得4hPCC组细胞摄取率达到94.75%。（3）PCC胶束可成功进入线粒体和溶酶体,并且随着时间的增加,CPT和CyOH的信号增加。3.体内实验:（1）体外4T1肿瘤球模型从球体的顶部到底部,CPT和CyOH的荧光强度从弱到强到弱,表明PCC具有优异的穿透能力。（2）在注射CyOH的小鼠中,用近红外成像系统检测肿瘤部位的荧光强度在12h最强,PCC组肿瘤部位的荧光值高于CyOH组,PCC组在解剖肿瘤中的荧光强度明显高于CyOH组。（3）治疗11天后,CPT和PCC组小鼠肿瘤体积明显小于对照组,小鼠体重没有明显变化,Tunel染色切片显示PCC能促进细胞凋亡,Ki67染色切片显示PCC组细胞增殖最少,小鼠的心、肝、脾、肺、肾H＆E切片均未见异常,对小鼠血液进行分析提示各项指标均正常。结论：1.PCC具有良好的结构稳定性及生物安全性,其具有的Zeta负性电位有利于提高药物在血液循环中的稳定性,从而延长血液循环时间。2.谷胱甘肽作用下的二硫键可以实现CPT的可控释放,维持有效的细胞毒性。此外,利用CyOH的荧光特性,能够在体外监测药物的摄取、体内药物的富集和成像,实现靶向性肿瘤治疗。3.相比CPT,PCC在体内、体外均表现出良好的肿瘤渗透性、选择性释药性能,具有更强的抗肿瘤活性,且对正常组织器官损害小。
其他文献
在新时代推进区域发展实现更平衡更充分的大背景下，需要站在国家区域协调均衡发展的战略高度，综合考虑“胡焕庸线”东西两侧的自然环境、经济社会发展不平衡现状及差距加速拉大的现实，提出沿博台线实现微突破的基本设想。研究认为，“胡焕庸线”是中国重要的人口地理分界线、重要的自然地理与生态环境分界线、国家主体功能区与国家生态功能区的分界线、中国新型城镇化主体区与非主体区的分界线、中国经济社会发展不平衡不充分的分
目的:探讨各型儿童自身免疫性脑炎（Autoimmune encephalitis,AE）的临床特征和头颅磁共振成像（Magnetic resonance imaging,MRI）影像特征,提高儿科医师对该疾病在儿童人群中的认识。研究方法:收集2015年1月-2020年6月深圳市儿童医院神经内科住院治疗的确诊AE患儿的临床资料进行数据统计及回顾性分析。将50例符合纳入标准的确诊AE患儿根据脑脊液和/
第一部分单中心36例儿童巨噬细胞活化综合征临床分析目的:巨噬细胞活化综合征（MAS）是一种继发于风湿免疫性疾病的危及生命的综合征,该并发症进展快、病死率高,早期识别、早期诊断与治疗对于MAS来说至关重要。本研究通过分析单中心儿童巨噬细胞活化综合征的临床表现、实验室检查特点、治疗及转归情况,以提高对该并发症的早期识别及诊治。研究方法:收集并整理分析2015年1月-2021年9月于深圳市儿童医院住院并
目的:了解单纯肠道病毒感染患儿抗生素使用比例、年度变化趋势,并探究影响单纯肠道病毒感染患儿使用抗生素的因素。方法:收集深圳市儿童医院2014-2018年5年来5月17日-6月15日确诊单纯肠道病毒感染的住院患儿临床资料及使用抗生素情况等进行回顾性分析,并分析影响使用抗生素的因素。结果:深圳市儿童医院2014-2018年5年来5月17日-6月15日确诊肠道病毒感染的住院患儿共1443例,经排除标准筛
目的:本研究评估工作记忆是否是影响注意缺陷多动障碍（ADHD）男童大脑功能连接和症状之间关系的中介因素,探讨ADHD可能的发病机制。研究方法:本研究纳入了71例8-9岁符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版（DSM-IV）ADHD诊断标准的男童,采用工作记忆指数作为工作记忆评估指标。由患儿家长填写Conners父母症状问卷（PSQ）和SNAP-Ⅳ评定量表（SNAP-Ⅳ）,使用多动指数、注意力不集中及
目的:总结牛奶蛋白过敏患儿的临床特征;对比分析食物激发实验及Co Miss评分对牛奶蛋白过敏的诊断价值;探索使用部分水解蛋白配方进行食物激发实验的意义并监测免疫耐受形成的时间。研究方法:研究纳入2019年04月至2022年2月于深圳市儿童医院消化内科确诊为牛奶蛋白过敏患儿。第一部分:收集35例通过食物激发试验确诊为轻中度非Ig E介导牛奶蛋白过敏患儿的临床资料及临床信息（家族过敏史、生后早期（1月
木薯干是淀粉含量较高,价格低廉的初级农产品。2012年以来,我国年平均进口量已逾700万吨,并呈现逐年增大趋势,其携带入境的植物疫情风险也在增大。仓储害虫是木薯干中携带的最主要的有害生物类型,其检出情况也日趋复杂。本文详细分析了2007—2017年全国口岸进口木薯干中截获的仓储害虫情况,统计并分析了包括锯谷盗科、拟步甲科、长蠹科在内的28个科,174种,65 647种次仓储害虫截获频次和分布,提出
目的:本研究通过回顾性分析幼年皮肌炎患者的临床资料,观察难治性幼年皮肌炎患者临床特征,总结托法替布治疗难治性幼年皮肌炎的有效性及安全性。方法:（1）回顾性收集2012年1月至2021年1月期间于深圳市儿童医院住院诊疗的幼年皮肌炎患者的临床资料,总结其临床特点。（2）回顾性收集2012年1月至2021年1月期间于深圳市儿童医院住院诊疗的难治性幼年皮肌炎患者临床资料,总结其临床特点。（3）将难治性幼年
目的:新生儿坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis,NEC）是新生儿期消化道急症,重症NEC死亡率高,即使存活大多需要行手术治疗,预后不佳,会对新生儿造成终身影响。本文旨在探讨通过宏基因组测序手段对比重症NEC患儿与非NEC对照组患儿差异菌群及代谢途径,为重症NEC患儿的诊断及治疗提供临床思路。研究方法:本文通过前瞻性病例对照研究,探索2020年9月-2021年9月深
＜正＞ 结构相似性分析和主要成分分析两个统计学方法是用来按照重油的组成和化学结构进行重油的定量比较和分类的。被选做样品的有七个不同类型原油的减压渣油,三个天然沥青,十个溶剂抽提渣油,一个溶剂抽提油,四个裂化重油和一个石油沥青样品。