巴西固氮螺菌(Azospirillumbrasilense)是一种联合固氮菌，主要定殖在禾本科作物根际表面。在巴西固氮螺菌中，NifA蛋白是所有固氮基因(nif基因)的转录激活蛋白。但在该菌中，既没有发现类似FixL/FixJ双组分调节系统，也没有发现NifL蛋白。因此本实验室以NifA蛋白为诱饵，利用酵母双杂交系统从巴西固氮螺菌染色体DNA文库中筛选与NifA蛋白有直接相互作用的蛋白，共获得4个相关蛋白。本研究对其中两个蛋白FhuE和Org35功能研究。 fhuE基因编码的蛋白与Escherichiacoli中的铁受体蛋白FhuE蛋白具有很高的同源性，同源性高达57％。E.coli的FhuE蛋白是氧化肟型铁载体的受体蛋白，负责粪原因子形式铁载体的运输。本研究表明，A.brasilenseSp7的fhuE基因编码粪原因子形式铁载体的铁受体蛋白，负责粪原因子的吸收利用。 Org35是个杂合的双组分信号转导蛋白，包含三个结构区域，即PAS结构域(PAS)、组氨酸蛋白激酶区域(HPK)、响应调节蛋白区域(RR)。PAS结构域主要存在于一些直接或间接参与信号转导的蛋白质中，充当传感器区域，感受外界环境的变化。PAS结构域广泛地存在于双组分信号转导系统当中，是感受信号的重要方式。本研究通过Org35和NifA在Ecoli中共同表达、纯化。在蛋白水平上，证明了Org35和NifA存在互作，并且Org35通过PAS结构域与NifA相互作用。本研究利用酵母双杂交系统证明HPK和RR区域存在相互作用。 在Ecoli中分别表达和纯化了Org35、Org35-HPK、Org35-RR蛋白。蛋白磷酸化实验表明Org35的组氨酸蛋白激酶区域能够自我磷酸化，并且能够将磷酸基团传递给响应调节蛋白区域。结果表明Org35的HPK区域和RR区域分别行使了组氨酸蛋白激酶和响应调节蛋白的功能。从生化水平上，证实Org35是一个杂合双组分信号转导蛋白。 进一步研究表明，Org35蛋白参与细菌的生长和趋化，与细菌的趋氧、趋光、鞭毛形态、运动性等生物学特性无关。org35基因是一个多效基因。