肝癌差减杂交文库的构建及钙磷脂结合蛋白Ⅱ在肝癌中的表达

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原发性肝癌是世界第六位、中国第三位常见恶性肿瘤。据国际癌症研究中心(IARC)估计,2000年全球肝癌发病人数为56.4万人,其中约55%发生在中国,即中国肝癌发病人数约为30.6万人,肝癌死亡人数约30.0万人。我国肝癌发病人数呈逐年上升趋势,2005年中国肝癌发病人数达到34.5万人。 分子生物学研究表明,肝癌的发生是一个由多基因参与、多步骤、多阶段、由体内外因素相互作用的复杂过程。以往针对肝癌的研究仅限于个别或某几个基因,而缺少针对肝癌所涉及的众多基因全面、系统的认识,不利于肝癌发病机制、诊断、治疗等方面的发展。所以,系统地研究肝癌发生发展过程中的分子事件就显得尤为重要。 近年来克隆差异表达基因的方法不断涌现,其中应用抑制差减杂交(SSH)结合cDNA芯片技术是简单、快速分离差异基因的方法之一。自上世纪九十年代以来,该项技术已被成功应用于胃肠道肿瘤、生殖系统肿瘤、心血管疾病等差异表达基因的研究。SSH操作进行二次差减杂交和二次PCR,对两个比较组之间的表达基因进行了筛查,富集了大量差异表达基因,其中还包括一些新基因或表达序列标签,经高通量cDNA芯片鉴定后即可获得大量有价值的信息。本文应用SSH结合cDNA芯片的方法,筛选并鉴定肝癌中特异表达的基因,并
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