自体软骨移植是目前整形美容工作中最常用的手段，软骨移植在改善受区外观的同时，对供区的生理功能、外观一定会造成不同程度的损伤。长期以来，供区继发病变,进行性供区结构异常,移植物早期吸收,有限的可供使用的软骨块体积及移植软骨与受区结合能力差等,是自体软骨移植中主要的缺点。因此，如何在矫正畸形的同时，最大程度的避免及减轻对供区的损伤，增加可利用组织量一直是临床医生面临的难题之一。软骨膜再生软骨以及细胞因子的在各个过程中的作用一直备受关注。目的探讨以胶原蛋白海绵为载体，复合重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)植入兔耳软骨缺损体内诱导软骨膜再生软骨的效果。方法选用健康成年日本大耳白兔9只,雌雄不限，体重2.5kg左右。随机将兔分为胶原蛋白海绵组、含0.5mg/ml的rhBMP-2/胶原蛋白海绵复合物、空白对照组三组。盐酸赛拉嗪注射液肌肉注射麻醉（0.2mL/kg），两耳以碘伏消毒，在每侧距耳根5cm兔耳背侧中后部、避开血管用美兰标记切口线及1cm×1cm软骨切除区。适量0.5%利多卡因注射液在术区行皮下肿胀麻醉，沿切口线切开皮肤，仔细切开软骨膜，注意避免损伤软骨，用骨膜剥离子在软骨膜下仔细分离，去除1cm×1cm软骨，完整保留软骨膜。A组(6只耳):软骨缺损区植入与取出软骨同等大小、厚度的胶原蛋白海绵于软骨膜内。B组(6只耳):软骨缺损区植入与取出软骨同等大小、厚度的含0.5mg/ml浓度的rhBMP-2/胶原蛋白海绵复合物于软骨膜内。C组(6只耳):空白对照组,不植入任何材料。术区间断缝合，伤口涂莫匹罗星软膏。术后4、8、12周行盐酸赛拉嗪注射液肌肉注射麻醉（0.2mL/kg），取材,去除软骨膜观察新生软骨情况、面积；通过HE染色、Masson染色和醛品红染色，观察标本中细胞浸润和分化生长情况、新生软骨情况和弹力纤维变化和生成情况。采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图像分析仪测定新生软骨的面积。结果1.大体观察：术后伤口均愈合良好，术后4周,与正常软骨之间界限可清楚辨认，各组术区无明显差别。术后8周A组软骨缺损区与周围正常软骨界限仍可清晰辨认。B组软骨缺损区新生软骨膜下组织，质韧、与周围正常软骨界限略不清楚。C组软骨缺损部位塌陷明显，但其表面皮肤无异常改变。术后12周，A组形成的新生软骨组织质地坚韧，与周围正常软骨界限尚可辨认。B组术区与周围正常软骨界限消失，颜色、质地、厚度与正常软骨较为相似。C组修复部位塌陷较8周略不明显，表面皮肤无破溃、无发红改变，界限仍清楚。2.组织学观察：术后4周，醛品红染色，各组均未见新生弹力纤维。A组：软骨细胞分布较为平均，软骨基质内细胞浸润很少,排列没有方向性。B组软骨膜明显增厚，软骨基质内细胞浸润也较少,可见成软骨细胞浸润到胶原蛋白材料的结构内。C组软骨膜较为增厚,细胞数目较多,以大量的成纤维细胞为主,偶见较典型的成软骨细胞,炎症性细胞较多见；术后8周，各软骨缺损内均未见胶原蛋白海绵。A组：软骨基质内各种细胞浸润少,仍有炎症细胞浸润，与正常软骨交界处连接尚不完整。B组软骨膜明显较薄,表现为少见或无,有典型的成软骨细胞出现，见有少量新生的弹力纤维形成。C组：软骨膜细胞较4周时明显减少,成软骨细胞多见,可见少量新生的细小血管,炎症细胞消失；术后12周：A组：新生软骨较正常软骨略微变薄，细胞排列较为紊乱，基质异染、色淡，与正常软骨仍没有完全连接，见少量新生的弹力纤维形成。B组：新生软骨较为接近正常软骨，表面细胞表现为平行排列，深层细胞排列较为紊乱，基质异染，与正常软骨连接良好，见大量的新生弹力纤维。C组：软骨缺损边缘及底部形成有少量软骨细胞，分布明显不均匀。采用盲法对各标本依次进行组织学评分，评分标准采用Wakitanifa法[1]。A组、B组和C组在各个时期均存在显著性差异有统计学意义（P<0.01）。两个实验A、B组在4、8、12周比较差异有统计学意义（P<0.01），同一时间点，两实验组间的比较差异均无统计学意义（P〈0.05）。3.测定新生软骨的面积：采用HPIAS-1000高清晰度彩色图像分析仪来测定新生软骨的面积,用像素表示。将所有的标本完整的去除软骨膜暴露软骨，平行切片,经HE染色后,测定软骨膜间新生软骨面积。胶原蛋白海绵组、rhBMP-2/胶原蛋白海绵复合物组、空白对照组像素分别为1452±549.8，1962±524.4,1197±496.2。方差分析，三组结果有显著性差异有统计学意义（P〈0.05）。结论1.rhBMP-2能促进促进软骨膜处的软骨再生。2.胶原蛋白海绵可作为rhBMP-2安全有效的载体，同时为软骨膜再生软骨提供条件。3.提示胶原蛋白海绵有利于软骨膜再生的作用。4.二者复合体的应用为软骨切取术后的修复软骨缺损提供了一种新方法。