胆结石有序结构的体外模拟与溶石剂的筛选研究

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胆结石发病率正在逐年增加,其形成机理和治疗方法一直以来引起医学及其他学科的广泛关注。本文在体外模拟实验体系中研究甘油三酯等对胆结石形成的影响,通过溶剂筛选研究优化得到低毒复合溶石剂,为临床治疗提供参考。在体外模拟胆结石有序结构的实验研究中,考察甘油三酯对Mn+-NaDC(脱氧胆酸钠)凝胶体系有序结构的影响及它与蛋白质、卵磷脂对该体系有序结构的综合效应。用扫描仪、体式显微镜和扫描电镜分别从三个尺度观测模拟体系中有序结构形貌,以FTIR光谱表征沉淀的微观结构。溶石一直是治疗胆结石的有效方法之一。针对从临床手术中取出的胆结石,以日常饮料、常见有机溶石剂、溶石剂1和卵磷脂等溶剂进行溶剂筛选研究,以溶石率作为优选指标,利用红外光谱表征溶解前后胆结石的微观结构,利用扫描电镜观察溶解前后胆结石的微观形貌,用能量色散谱仪测定胆结石表面元素含量。研究结果表明:(1)三油酸甘油酯(GTO)对不同Mn+-NaDC凝胶体系有序结构影响不同:在GTO-Ca2+-NaDC凝胶体系沉淀生长初期高浓度三油酸甘油酯抑制沉淀的生成;高浓度GTO促进GTO-Cu2+-NaDC凝胶体系形成蓝色沉淀并使沉淀从混沌状态向颗粒状分形转化; GTO能抑制GTO-Co2+-NaDC凝胶体系产生粉色沉淀;促进GTO-Ni2+-NaDC凝胶体系形成周期环。(2)牛血清白蛋白(BA)、三油酸甘油酯和蛋黄卵磷脂(EYL)对Mn+-NaDC凝胶体系综合影响:促进GTO-BA-EYL-Cu2+-NaDC凝胶体系和GTO-BA-EYL-Ni2+-NaDC凝胶体系形成颗粒分形沉淀和周期环;促进GTO-BA-EYL-Ca2+-NaDC凝胶体系和GTO-BA-EYL-Co2+-NaDC凝胶体系产生花状和枝状分形沉淀。高浓度牛白蛋白促进各体系周期环的形成,三油酸甘油酯和蛋黄卵磷脂则是对不同体系的分形有不同影响。(3)沉淀的扫描电镜表明,GTO、BA和EYL改变沉淀结晶形态的长宽比和定向排列性;红外光谱分析显示GTO和EYL在浓度较高时可以参与金属离子配位,沉淀为多配体组分的混配物,具有非化学计量特征。经过系统的筛选实验研究,得到几组较优溶石剂:(1)溶石剂1和卵磷脂混合溶剂的溶石效果较好,溶石率达98.30%;(2)溶石剂5和溶石剂4组成的混合溶剂对不同胆结石的溶解效果优于单一溶剂,对混合型胆结石的溶石率达81.01%;(3)考察中药溶石配方中的中药溶剂1在溶石过程中的协同作用,发现其可以有效增加溶石率。(4)溶解前后胆结石的扫描电镜图表明,溶石剂1和增溶剂A的混合溶剂对胆固醇型结石中的胆固醇和基质都有良好溶解效果,加入中药溶剂1能对胆结石的外壳和内部都产生溶解。从溶石率和溶石剂有无毒副作用综合评价,溶石剂1和增溶剂A的混合溶剂是最佳溶石剂。本文进行的胆结石有序结构的体外模拟和溶石剂的筛选研究结果分别对揭示胆结石形成机理、仿生材料功能性研究以及结石的临床治疗有重要意义。
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