红波罗花碱A（Delavatine A）是一种从紫葳科角蒿属植物红波罗花（Incarvillea delavayi）中分离的含有异喹啉并环烷新型骨架的生物碱类化合物。经课题组前期的活性筛选发现,Delavatine A对颅脑创伤造成的星形胶质细胞过度活化具有抑制作用,对肿瘤细胞的增值也具有一定的抑制作用。目前尚未有其它活性的报道。缺血性脑卒中是由于脑部血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起的脑组织损伤的急性脑血管疾病,其发病机制复杂,兴奋性神经毒性作用、神经炎症、能量代谢障碍、半暗带去极化及细胞凋亡等都共同参与了缺血性脑卒中的病理变化过程。考虑到Delavatine A在前期筛选中表现出的可能的神经保护作用,我们在本课题中对Delavatine A在谷氨酸诱导的神经细胞损伤、LPS诱导的小胶质细胞活化方面进行了体外神经保护作用研究,并对Delavatine A在大鼠缺血再灌注损伤模型的保护作用进行了研究。1.神经保护作用的细胞筛选。首先在多个细胞水平,采用谷氨酸损伤模型,考察Delavatine A对细胞存活率、LDH释放、细胞形态、细胞凋亡以及凋亡蛋白的影响。分别采用CCK-8法、LDH释放检测法、荧光染色显微镜观察法、流式检测凋亡细胞、Western Blot检测凋亡蛋白的方法,结果表明Delavatine A具有显著的神经保护作用,能有效对抗由兴奋性神经递质谷氨酸引起的细胞损伤与细胞凋亡,具有显著的抗兴奋性神经毒性作用。2.抑制兴奋性神经毒性的初步作用机制研究。从钙离子稳态和抗氧化两个方面考察了细胞内钙离子Ca²⁺含量、线粒体膜电位、ROS、GSH和SOD等,结果表明,Delavatine A不仅能有效阻止Ca²⁺的内流,维持线粒体膜电位,以平衡细胞内外离子稳态;还能有效减少活性氧ROS的产生,增强还原酶的活力,以对抗氧化应激反应,从两个方面共同发挥抗兴奋性神经毒性作用。3.抑制LPS诱导的小胶质细胞的炎症作用研究。以LPS刺激BV-2神经小胶质细胞为研究对象,考察Delavatine A在细胞水平的抗炎作用。分别采用Griess法、ELISA、RT-PCR检测了化合物对炎症因子NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的调控,并从基因与蛋白表达方面研究了调控炎症因子的分子机制。实验结果显示,Delavatine A主要通过下调iNOS、COX-2蛋白,抑制NF-κB通路p65与IκBα蛋白磷酸化而发挥抗炎作用,而对PI3K/Akt和MAPK信号通路蛋白的表达或磷酸化无调控作用。4.保护大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的作用研究。在评价Delavatine A对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的作用时,以ICR小鼠为实验对象,并通过剂量换算公式用以确定Delavatine A作用于SD大鼠的适宜剂量,后续采用可逆性大脑中动脉闭塞线栓法,以局灶性脑缺血再灌注模型（middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R）大鼠为研究对象,考察缺血再灌注大鼠的神经功能缺失体征评分和脑梗死体积。实验结果显示,5 mg/kg和10 mg/kg的Delavatine A对脑卒中模型大鼠具有良好的治疗效果。表明Delavatine A在动物体内同样具有良好的神经保护作用。