【摘 要】
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该课题拟在以往的实验基础上,利用动物诱癌模型和体外细胞培养方法,研究端粒酶在致癌过程听表达规律以及机理,并研究端粒酶抑制剂对肿瘤细胞和动物癌变过程的影响作用,为阐明
【出 处】
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中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学
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该课题拟在以往的实验基础上,利用动物诱癌模型和体外细胞培养方法,研究端粒酶在致癌过程听表达规律以及机理,并研究端粒酶抑制剂对肿瘤细胞和动物癌变过程的影响作用,为阐明端粒酶激活的调控机制和促进端粒酶抑制剂的临床应用打下理论基础,该课题的研究内容分为以下四个部分:1、TRAP法的建立和肿瘤组织中端粒酶活性测定;2、动物诱癌过程端粒酶的表达规律以及端粒酶抑制剂的抗肿瘤作用;3、端粒酶抑制剂体外抗肿瘤细胞的实验研究;4、端粒酶活性与细胞周期素D1以及细胞凋亡的关系.研究方法和结果按上述四个部分来论述.结论:1、采用TRAP法对人大肠癌组织进行端粒酶活性的检测,显示端粒酶特异性地表达于恶性肿瘤细胞中.2、人体细胞端粒酶活性大多数阴性,而大鼠多数器官的体细胞端粒酶活性呈弱阳性.3、在1,2-二甲肼诱导的SD大鼠大肠癌模型中,端粒酶活性在染毒后的第5周就开始升高,到第15周达到高峰,然后维持在高水平.染毒组端粒酶活性比对照组平均高2-4倍,端粒酶在大肠组织未形成肿瘤之前就被激活,并在肿瘤的发生、发展中起重要的作用.4、端粒酶模板区的硫代反义寡核苷酸具有抗肿瘤作用,使大鼠大肠癌发生率减少17.6﹪.TPAO抑制肿瘤的作用与端粒酶活、癌前病变和细胞增殖的抑制有关.5、端粒酶抑制剂TPAO和AZT在一定剂量范围内有抑制A549、HC8693、L7402和Hela肿瘤细胞株端粒酶的活性和抑制细胞增殖的作用,且抑制细胞增殖的作用与抑制端粒酶的作用成正相关.6、TPAO抗动物肿瘤形成的作用与抑制CYCLIND1蛋白表达和诱导细胞凋亡有关.7、AZT和TPAO体外抗HELA细胞的作用与细胞周期G1期的阻滞以及CYCLIND1蛋白表达的抑制有关.端粒酶活性的降低与CYCYLIND1蛋白表达的抑制成正相关;但与诱导细胞凋亡作用成负相关.
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