论文部分内容阅读
影响中药发展一个主要的原因是中药的药理作用机制很难用现代科学理论加以合理的解释。揭示中药药理作用机制是开发新药的基础性工作之一。我国传统名贵中药之一的血竭具有镇痛作用,而且这种镇痛作用可能部分是通过其成分龙血素B直接干预初级感觉神经元背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)细胞电压门控性钠通道,阻碍痛觉信息传人而产生的。另一方面龙血素B对三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)细胞河豚毒素不敏感型钠通道电流的调制作用可能也是血竭参与颜面部镇痛的内在机制。然而龙血素B除了对电压门控性钠通道具有调制作用可以干预痛觉信息传入外,是否还通过其它途径影响痛觉信息的中枢传入呢?这是一个值得进一步探讨的问题。辣椒素是辣椒中的主要辛辣成分,可以通过激活感觉神经从而将伤害性刺激信息传导至中枢,其受体--辣椒素受体(vanilloid receptor, VR1)在疼痛传导过程中也具有相当重要的作用,它可被多种伤害性刺激(辣椒素、H+和伤害性热刺激)所激活,而且该受体通道与电压门控性钠通道一样主要存在于初级感觉神经元上。龙血素B是否能够通过影响辣椒素受体通道而成为干预痛觉信息传入的的另一种原因呢,两种调制作用之间是否存在着内在联系也有待深入探讨。本文运用不同的方法和途径研究中药血竭的镇痛机理,确定其成分龙血素B干预痛觉中枢信息传入的具体药理效应,为中药血竭的镇痛药理研究提供了新的思路和方法。首先应用全细胞膜片钳实验技术观察了龙血素B对大鼠背根神经节细胞辣椒素诱发电流的反应,对辣椒素所引起的细胞膜去极化电位的影响以及对受体通道翻转电位的作用,再采用Alexander I. Sobolevsky所提出受体与配体结合模型拟合膜片钳实验所得数据,估计龙血素B作用前后大鼠背根神经节细胞辣椒素诱发电流的参数。结果显示,辣椒素受体拮抗剂辣椒卓平可以完全抑制辣椒素受体电流;龙血素B对辣椒素受体电流以及辣椒素所引发的细胞去极化电位具有浓度依赖性抑制作用;低浓度的龙血素B对电流和去极化膜电位几乎没有影响,而高浓度的龙血素B几乎完全抑制了受体电流和去极化膜电位;此外发现龙血素B对辣椒素受体通道的翻转电位几乎没有影响;由拟合结果显示龙血素B与辣椒素受体的相互作用符合简单的一个配体和一个受体位点相结合的作用模式。上述研究结果说明龙血素B除了能够通过调制初级感觉神经元背根神经节细胞电压门控性钠通道,干预外周痛觉信息的中枢传入产生镇痛作用之外。还可能通过影响初级感觉神经元上的辣椒素受体通道而影响痛觉信息的传递。这也是血竭产生镇痛作用的另一种可能的药理机制。此外,通过受体配体结合模型模拟结果发现龙血素B在辣椒素受体通道中仅有一个结合位点,龙血素B正是与其相结合而阻断钙离子等离子的内流从而抑制辣椒素所诱发电流的产生。因此龙血素B可能是通过影响初级感觉神经元背根神经节细胞电压门控性钠通道以及辣椒素受体通道的双重作用而阻断痛觉信息的传入的。在以前研究的基础上,本研究阐明了龙血素B对电压门控性钠通道以及辣椒素受体通道的双重作用从而影响痛觉信息的传递,导致血竭产生镇痛作用,其结果将不仅有助于源于血竭的镇痛新药的研发,对其它中药的研发也将具有一定的参考意义。