论文部分内容阅读
目的:
1.探讨慢性心力衰竭(CHF)中医辨证分型的客观规律,获知CHF临床最多见的几种证型。
2.确定CHF临床最多见的几种证型所对应的代表方剂中对异丙肾上腺素致大鼠心室重构的最佳疗效方药。
3.进一步探讨这几种代表方剂对异丙肾上腺素致大鼠心室重构中胶原含量及其代谢酶的影响。
方法:
1.对1978年以来的CHF辩证分型的文献进行归纳和分析,对CHF各种证型的病例数构成比进行多组间X2检验及组间两两比较。
2.以异丙肾上腺素建立大鼠心室重构模型,用CHF临床最多见的几种证型的对应代表方剂分别干预5周和15周。
3.经右颈动脉逆行将PE50导管插入左心室,连接多导生理记录仪,记录检测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力最大上升速率(+dp/dtmax)、左室压力最大下降速率(-dp/dtmax);经右颈动脉逆行将热敏探头插入升主动脉,连接多导生理记录仪,记录检测心输出量;称取大鼠体重(BW)、全心重量(HW)及左室重量(LVW),计算HW/BW以及LVW/BW; HE染色,光镜观察心肌形态学改变。
4.用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清ANP、BNP、NE和Ang II水平。
5.通过SABC法免疫组化染色方法检测I、III型胶原含量及I/III型胶原含量比;通过明胶酶谱和Western blotting法检测胶原酶MMP-2的酶活性和蛋白表达水平。
结果:
1.CHF中医辨证分型文献的统计分析结果:心肾阳虚、阳虚水泛、气虚血瘀、气阴两虚、心肺气虚等依次为26种证型中病例数最多的5种证型,这5种证型的病例数构成比均显著大于其它21种证型(p<0.05);心肾阳虚证是CHF阳虚类证中病例数分布最多的证型,气虚血瘀证是血瘀类证中病例数最多的证型,气阴两虚证是同类证型中病例数分布最多的,心肺气虚证是气虚类证中病例数分布最多的,且这几种证型的病例数构成比均显著高于同类证型中的其它证型(p<0.05)。CHF26种中医证型中以虚证命名的证型有18种,这18种证型的病例数共占26种证型总病例数的87.78%;阳虚、气虚、气阴虚依次为病例数最多的三类虚证,这三类虚证的病例数之和占所有虚证总病例数的86.6826; CHF26种中医证型中,有10种命名中包含病理产物(或病理因素),其中,命名中包含水饮和血瘀这两种病理因素的证型的病例数构成比共计82.7%。CHF26种中医证型中,有16种命名中有病位要素,其中,命名中包含病位要素心、心肾、心肺、肺的证型的病例数构成比共计93.18%,心出现的证型频次共为12次,病例数构成比共计83.21%;肾、肺出现的证型频次均为4次,病例数构成比分别共计35.29%和26.56%。
2.血流动力学实验结果:5周时,模型组的LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax均与正常组无显著性差异(p>0.05);15周时,模型组的LVEDP显著高于正常组(p<0.05),LVSP、+dp/dtmax、-dP/dtmax均较正常组显著降低(p<0.05);与15周的模型组比较,依那普利组、补阳还五汤组、肾气丸组、补肺汤组、真武汤组的左室收缩压较高(p<0.05),补阳还五汤组、肾气丸组、生脉饮组、补肺汤组的左室舒张压较低(p<0.05),肾气丸组的+dp/dtmax较高(p<0.05)。
3.心输出量(CO)实验结果:5周和15周时,模型组的CO均显著低于正常组(p<0.05);15周各组的CO均显著低于5周各组的CO(p<0.05);5周时,与模型组相比,依那普利组、补阳还五汤组、肾气丸组、生脉饮组和真武汤组的心输出量较高(p<0.05),15周时,与模型组相比,依那普利组、补阳还五汤组、肾气丸组、补肺汤组和真武汤组的心输出量较高(p<0.05)。
4.心脏相对重量(HW/BW)和左室相对重量(LVW/BW)的检测结果:5周和15周时,正常组的HW/BW和LVW/BW均显著低于模型组,且模型组15周时的HW/BW显著高于5周时的HW/BW(p<0.05);5周时,与模型组比较,依那普利组的HW/BW较小(p<0.05),依那普利组、真武汤组的LVW/BW较小(p<0.05);15周时,与模型组比较,依那普利组,5个中医复方组的HW/BW均较小(p<0.05),依那普利组、补阳还五汤组、生脉饮组、真武汤组的LVW/BW较小(p<0.05)。
5.心肌病理形态学观测结果:5周和15周的正常组大鼠的心肌细胞形态正常,无病理变化;5周时,模型组有较多成纤维细胞和新生毛细血管,肉芽组织较明显,15周时,模型组的成纤维细胞进一步退化成纤维细胞,呈现广泛纤维化,形成疤痕组织;5周和15周时,依那普利组和5个中医复方组的心肌细胞均有一定程度的病理变化,但5周时的病理改变主要表现为较多的成纤维细胞和新生毛细血管,15周时的病理改变主要表现为纤维细胞堆积,心肌细胞肥大。
6.血浆中神经内分泌因子的检测结果:5周和15周时的模型组血清ANP和BNP的浓度均显著高于正常组(p<0.05),但15周模型组的ANP含量与5周模型组比较,无显著性差异,15周模型组的的BNP浓度却显著高于5周模型组(p<0.05);5周时,与模型组比较,依那普利,5个中医复方组的ANP含量均较低(p<0.05),而仅有补阳还五汤组的BNP含量较低(p<0.05);15周时,与模型组比较,依那普利组、肾气丸组的ANP含量较低(p<0.05),而依那普利组和5个中医复方组的BNP含量均较低(p<0.05)。5周模型组的血清NE浓度高于正常组,但无显著性差异,15周模型组的血清NE显著高于正常组(p<0.05);5周和15周时,依那普利组和5个中医复方组的NE与模型组比较均无显著性差异;5周和15周,模型组的血清Ang II浓度与正常组比较均无显著性差异。
7.I、III型胶原含量和I、III型胶原比的检测结果:正常组的肌纤维排列整齐,形态基本一致,胶原表达较少,模型组的心肌纤维排列紊乱,可见较多炎症细胞浸润,成纤维细胞多见,胶原表达明显增多,I、III型胶原含量和I、III型胶原比均显著高于正常组(p<0.05);与模型组比较,依那普利组、补阳还五汤组、肾气丸组和真武汤组的胶原表达较模型组明显减少,I、III型胶原含量和I、III型胶原比均较低(p<0.05),而生脉饮和补肺汤组的胶原表达较多,I、III型胶原含量和I、III型胶原与模型组比较无显著性差异(p>0.05)。
8.胶原酶MMP-2的酶活性和蛋白表达水平的检测结果:模型组的MMP2酶活性显著高于正常组,依那普利组、补阳还五汤组、肾气丸组和真武汤组的MMP2酶活性均显著低于模型组(p<0.05);正常组、依那普利组、补阳还五汤组、肾气丸组和真武汤组的MMP2蛋白表达量均显著低于模型组(p<0.05)。
结论:
1.对慢性心力衰竭的现代文献统计分析得知:心肾阳虚证、阳虚水泛证、气虚血瘀证、气阴两虚证、心肺气虚证是CHF患者最多见的五种证型;CHF以虚为主,本虚标实,虚证中又依次以阳虚、气虚、气阴虚最为常见;CHF最主要的病理产物(或病理因素)为血瘀和水饮,其次为痰浊;CHF的病位主要在心,在发病过程中最易涉及到肾、肺两脏器。
2.异丙肾上腺素性大鼠心室重构模型造模后5周,心功能仍有较好的代偿能力;造模后15周,心室失去代偿能力,反映心功能的多项指标均呈病理性改变。
3.补阳还五汤、肾气丸、真武汤对异丙肾上腺素致大鼠心室重构早期(5周)和晚期(15周)均有一定的改善作用,但这种改善作用在晚期时更为明显。
4.补阳还五汤、肾气丸、真武汤对异丙肾上腺素致大鼠心室重构中的胶原酶MMP-2的蛋白表达和酶活性有一定的抑制作用。