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本实验以复合磷脂酶法制备甘油磷酸胆碱（GPC），通过确定了甘油磷酸胆碱的纯化技术，并利用萃取液中的脂肪酸进行甲酯化反应，实现了反应底物的综合利用。通过本研究得出下述主要结论：（1）在水相体系下利用磷脂酶A1和磷脂酶A2联合酶解制备GPC，不仅极大地降低了反应时间，更可有效地提高GPC的制取率。通过响应面优化试验确定最佳酶解条件为：底物浓度61g/L、酶解温度45.2℃、磷脂酶A1添加量16.86U/mL、磷脂酶A2添加量21.98U/mL、CaCl2添加量5.18%，此条件下，GPC得率有最优值为96.01%。（2）在非水相体系下利用磷脂酶A1和磷脂酶A2联合酶解制备GPC，不仅极大地降低了反应时间，更可有效地提高GPC的制取率。通过响应面优化试验确定最佳酶解条件为：底物浓度92.1mg/mL、酶解温度50.46℃、磷脂酶A1添加量12U/mL、磷脂酶A2添加量12U/mL、CaCl2添加量4.50mg/mL，此条件下，GPC得率有最优值为95.34%。（3）探讨了不同层析纯化甘油磷酸胆碱及其稳定性，研究以复合磷脂酶酶解工艺制备的GPC为底物，比对了冷冻结晶法、硅胶柱层析法及离子交换树脂法纯化效果，研究得出硅胶柱层析及离子交换树脂是GPC样品的有效纯化技术，经过两种技术纯化处理后GPC样品纯度在98%左右。GPC在非水相体系下的制备减少卵磷脂及LPC的分离过程，简化纯化步骤。由硅胶柱层析及离子交换树脂技术纯化制备的GPC的稳定性强、产品质量标准达到国外同类产品的质量要求。（4）利用超声波辅助催化促进甲醇与GPC复合酶解制备萃取液中的脂肪酸发生转酯化反应，采用响应面优化法得到该反应最佳工艺条件：甲醇：萃取液比例16.45:1，超声辅助甲酯化反应时间16.04min，超声功率311.4W，NaOH催化剂用量1.90%，在此条件下，脂肪酸甲酯转化率有最优值为92.57%。