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氯硝柳胺(Niclosamide: Nic)控制钉螺是预防日本血吸虫病的有效方法,但Nic对鱼虾毒性大,2g/m3浸杀钉螺和鱼虾死亡率均达95%以上,其致死机制还缺乏深入和系统研究。本文选用经济价值高、分布广的草鱼和团头鲂为材料,以Nic和SX生物碱为供试药物,用组织匀浆法制备酶液,探讨其生化代谢重要酶AchE、GOT及GPT对灭螺药物的敏感性。这为评价灭螺药物致鱼死亡机制提供依据。主要研究内容如下:
1、草鱼和团头鲂AchE、GOT及GPT活性的组织分布特征
用比色法分别测定受物组织的酶活性表明:AchE在草鱼和团头鲂脑中活性分布最高,分别达到34.27和50.73%;草鱼和团头鲂肝脏中GOT和GPT活性分布均达到最高,其中草鱼中两种酶活性分布分别达到25.81和30.88%,团头鲂中分别达到36.45和32.68%。这为研究选择靶标组织提供了依据。
2、草鱼和团头鲂脑AchE/肝脏GOT、GPT反应的动力学特征
用L25(56)和极(方)差分析表明:3种酶的最适测定条件与鱼种类和组织有关。这为在最适条件下研究酶对灭螺药物的敏感性提供了试验设计依据。
3、灭螺药物对草鱼和团头鲂脑AchE/肝脏GOT、GPT活性的影响
在酶活性测定最适条件下测定灭螺药物对酶活性作用的剂量与时间效应。
3.1剂量效应
测定质量数为0.125~8.0mg/L的Nic和SX生物碱分别与酶温孵30min后的酶活性表明:草鱼GOT/GPT和团头鲂GOT活性均显示随药物(Nic和SX生物碱)质量数升高而增加(诱导)的正相关效应;草鱼AchE和团头鲂AchE/GPT活性均显示随着Nic质量数升高而减少(抑制)的负相关效应。
3.2时间效应
测定质量数为0.5mg/L的Nic和SX生物碱分别与酶温孵0~60min后的酶活性表明:草鱼和团头鲂的AchE、GOT及GPT活性均显示随着温孵时间延长而活性降低(抑制)的负相关效应。
上述结果提示:AchE、GOT及GPT可能是苯胺(Nic)和甾体生物碱(SX生物碱)致鱼毒性的靶点。