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目的：探讨幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）联合胃癌抗原对人外周血单核细胞来源树突状细胞（monocytederiveddendriticcell，MoDC）成熟和抗肿瘤功能的影响，并筛选Hp联合胃癌抗原致敏树突状细胞（dendriticcell，DC）的较优刺激时间。方法:利用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)，进一步通过贴壁法获得单核细胞，经RPMI-1640完全培养基、细胞因子rhGM-CSF（1000U/ml）和rhIL-4(500U/ml)诱导培养5天后分化为未成熟树突状细胞（immaturedendriticcell，iDC），培养过程中每3天半量换液和补充细胞因子rhGM-CSF和rhIL-4。在培养第5天分3组，Hp联合胃癌抗原致敏组（Hp+Ly-mDC组）加入胃癌细胞BGC823裂解物0.1mg/ml，4h后再加入Hp全菌超声裂解物10μg/ml和rhTNF-α50ng/ml；胃癌抗原致敏组（Ly-mDC组）加入胃癌细胞BGC823裂解物0.1mg/ml，4h后再加入rhTNF-α50ng/ml；空白对照组（iDC组）未加胃癌抗原、Hp及rhTNF-α；分别诱导培养8h、24h、48h和72h收获成熟树突状细胞（maturedendriticcell，mDC）。然后用倒置相差显微镜观察DC形态；用流式细胞仪检测DC表面CD83，CD86和HLA-DR的表达；MTT法检测混合淋巴细胞反应中DC刺激自体T细胞增殖能力；不同组DC诱导的特异性CTL作为效应细胞，胃癌细胞BGC823作为靶细胞，用LDH释放法检测特异性CTL的毒性杀伤作用；用ELISA方法检测细胞因子IL-12、IFN-γ的分泌水平。结果：（1）观察Ly-mDC组和Hp+Ly-mDC组具有形态不规则和大量毛刺状突起的典型mDC形态，两组形态变化无明显差异；（2）Hp+Ly-mDC组mDC表面标记分子CD83、CD86和HLA-DR平均表达百分率均高于Ly-mDC组和iDC组，其中CD83、CD86的表达水平差异有统计学意义(p＜0.05)，HLA-DR差异无统计学意义(p＞0.05)，Hp+Ly-mDC组和Ly-mDC组达到最高表达水平的刺激时间分别为24h和48h；（3）当刺激时间为24h，Hp+Ly-mDC组DC刺激T细胞增殖能力达最大(SI=3.52±0.31)；（4）Hp+Ly-mDC组特异性CTL对胃癌细胞的杀伤率高于Ly-mDC组和iDC组(p＜0.01)，且刺激时间为24h的杀伤率(43.41±1.85)%高于48h(37.67±1.93)%(p＜0.05)；（5）Hp+Ly-mDC组细胞因子IL-12、IFN-γ的分泌量在刺激时间为24h达最高水平，分别为（627.24±31.05）pg/ml，（1313.56±48.41）pg/ml，显著高于Ly-mDC组(p＜0.01)。结论：Hp全菌超声裂解物可促进DC的成熟和活化。Hp联合胃癌抗原刺激DC抗原提呈和抗肿瘤功能显著优于胃癌抗原。Hp联合胃癌抗原刺激DC成熟和活化存在时间动力学变化，其刺激DC成熟和活化的较优刺激时间为24h。