【摘 要】
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目的:建立石蜡包埋横纹肌肉瘤（RMS）组织中检测PAX3-FOXO1融合基因相关环状RNA--F-circP3F mRNA表达的RNA-FISH和BaseScope技术,探讨其临床病理学意义。方法:收集45例临床信息完整的RMS石蜡包埋组织标本,其中25例腺泡型RMS,12例胚胎型RMS,7例多形性RMS和1例梭形细胞RMS。分别应用RT-PCR、RNA-FISH和BaseScope技术检测不同亚
【基金项目】
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国家自然科学基金（NO.82173057）； 北京市自然科学基金（NO.7194272）；
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目的:建立石蜡包埋横纹肌肉瘤（RMS）组织中检测PAX3-FOXO1融合基因相关环状RNA--F-circP3F mRNA表达的RNA-FISH和BaseScope技术,探讨其临床病理学意义。方法:收集45例临床信息完整的RMS石蜡包埋组织标本,其中25例腺泡型RMS,12例胚胎型RMS,7例多形性RMS和1例梭形细胞RMS。分别应用RT-PCR、RNA-FISH和BaseScope技术检测不同亚型RMS石蜡包埋组织中F-circP3F mRNA的表达,并结合RMS的临床病理学参数,探讨F-circP3F mRNA表达的意义。结果:（1）本研究共收集45例RMS病例,男性26例,女性19例;其中大于5岁37例,8例小于5岁;肿瘤位于不同部位,主要位于头颈部及四肢;组织类型中共25例ARMS,12例ERMS,7例PRMS及1例SRMS;本组45例RMS患者的随访率为31%（14/45）,14例患者的术后总体生存时间为小于1个月到5年之间。（2）应用BaseScope技术检测福尔马林固定和石蜡包埋（FFPE）横纹肌肉瘤样本中F-circP3F mRNA的表达,以及通过FISH及RT-PCR实验检测F-circP3F的表达及分布。在我们的实验中,我们观察到F-circP3F在肿瘤细胞中根据肿瘤组织学分类的不同而表达不同,但其表达总体上与评估的阳性对照探针相当或以上。与预期的一样,PAX3-FOXO1、F-circP3F在腺泡型横纹肌肉瘤细胞里中-高表达,而在胚胎型横纹肌肉瘤中检测到较少信号或不表达。RT-PCR检测结果中,24例ARMS组织中18例F-circP3F表达阳性,其他组织类型及阴性对照中F-circP3F均为阴性表达。（3）根据RT-PCR结果,将45例RMS患者分为两组,F-circP3F表达组及F-circP3F不表达组,同时,将F-circP3F表达与收集到的患者的临床病理参数（性别、年龄、民族、肿瘤大小、肿瘤部位、TNM分期及组织学分级）进行相关性分析。结果显示:F-circP3F的表达只与组织类型和融合基因PAX3-FOXO1表达具有相关性,而与性别、年龄、民族、肿瘤大小、肿瘤部位、TNM分期及组织学分级不存在相关性。结论:（1）成功建立横纹肌肉瘤石蜡包埋组织中检测F-circP3F mRNA原位表达的RNA-FISH和BaseScope技术;（2）RNA-FISH与BaseScope检测RMS组织中F-circP3F表达的敏感性有待提高。
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