BMP15基因是卵母细胞分泌因子重要成员之一,其在卵泡发育和卵母细胞成熟过程中发挥重要作用。目前,有关BMP15基因的研究主要集中于人、山羊、牛、猪等,而尚未见兔BMP15基因的研究报道。因此,本文预通过对兔BMP15基因的克隆、蛋白定位及表达研究,探讨BMP15在兔生殖系统中所发挥的作用。根据GenBank公布的其它物种的BMP15基因序列合成引物,采用RT-PCR法从新西兰大白兔卵母细胞中克隆出卵母细胞分泌因子BMP15基因部分cDNA片段,并进行测序。结果显示,所克隆的BMP15基因总扩增片段为919bp,横跨外显子Ⅰ、Ⅱ,经blast比对,该序列与猪、牛、绵羊、山羊、人和小鼠的BMP15基因cDNA相应的同源性分别为83%、82%、82%、82%、80%和75%,为分离、克隆兔BMP15基因全序列提供了可能。根据兔GAPDH cDNA序列设计引物,以其PCR产物作为内标,分别以兔各个组织反转录产物为模板,通过半定量RT-PCR检测了BMP15 mRNA在兔多个组织中的表达情况,结果发现BMP15除了在卵巢、睾丸中表达外,还在下丘脑、垂体等非性腺组织中表达,预示着BMP15在这些非性腺组织中也可能发挥了一定的功能。采用免疫组化技术测定BMP15蛋白在性腺中的定位,结果显示:BMP15蛋白在兔卵巢初级卵泡、次级卵泡和有腔卵泡卵母细胞中均有高度表达,表明BMP15蛋白在启动卵泡发育后的整个过程中都发挥一定的作用。同时,在卵泡腔中也检测到该蛋白的表达,卵母细胞可能将该蛋白分泌至卵泡腔中,进而调节卵泡的发育。此外,还首次在哺乳动物黄体中发现了该蛋白的表达,推测可能由于物种差异,但该蛋白可能为黄体所分泌的卵泡抑素所拮抗,故不发挥作用。在睾丸中的定位结果显示,BMP15蛋白特异性表达于兔睾丸的精原细胞和圆形精子细胞,可见在精子的形成过程中起一定的调控作用。