【摘 要】
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目的:探讨核因子-κB(NF-κB)信号通路在七方胃痛方对幽门螺杆菌(H.pylori)感染人胃腺癌细胞(AGS)三叶因子1(TFF1)表达中的作用。
方法:从体外实验培养AGS和H.pylori，并
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目的:探讨核因子-κB(NF-κB)信号通路在七方胃痛方对幽门螺杆菌(H.pylori)感染人胃腺癌细胞(AGS)三叶因子1(TFF1)表达中的作用。
方法:从体外实验培养AGS和H.pylori，并按H.pylori感染AGS(100:1)共同培养24h，观察细胞的一般生长情况;双荧光报告基因系统分析TFF1启动子区NF-κB蛋白结合位点碱基序列区间;施以临床疗效确切的不同浓度七方胃痛方，通过凝胶阻滞电泳(EMSA)实验方法研究确定TFF1的NF-κB蛋白结合点及七方胃痛方抗肿癌的作用机制。
结果:H.pylori感染AGS共同培养24h后，与空白对照组相比，AGS发生明显的脱壁现象，贴壁细胞周边及培养液中可见较多菌体，及细胞崩解后的残留颗粒。TFF1(Wt)野生株和变异株基因转录表达较空白组均显著增加(P＜0.01)，TFF1(A)变异株基因表达显著低于Wt株(P＜0.01)，和其他TFF1变异株相比，差异有统计学意义（P＜0.05），变异株之间比较差异无统计学意义(P＞0.05)。EMSA结果显示:NF-κB抗体与DNA能特异性结合;H.pylori可以活化NF-κB的通路;七方胃痛方各浓度组作用于AGS后，随着其浓度的升高，而抑制NF-κB结合DNA的活性，并且这种作用抑制作用存在浓度依赖关系。
结论:双荧光和EMSA方法验证了TFF1启动子区NF-κB蛋白结合点;H.pylori感染AGS后，NF-κB信号通路增强;七方胃痛方可抑制NF-κB与DNA的结合活性;七方胃痛方的抗肿瘤作用可能是通过NF-κB信号通路途径起作用的;AGS细胞系可作为探讨TFF1基因表达诱导因素的细胞系。
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