氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌耐药性和基因多样性及解磷能力的影响

来源 :广东海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tvxq905
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
氟苯尼考(Florfenicol)作为动物专用抗菌药,对多种动物细菌性疾病有很好的治疗效果,因而在兽医临床上广泛使用。进入动物体内的抗菌药大部分会以原药或者代谢产物的形式排出体外,残留于水体和土壤等环境中,影响环境微生物的耐药性质。解磷菌广泛存在于土壤环境中,是一类能够溶解难溶性磷酸盐,为植物的生长发育提供可直接利用磷元素的功能微生物。为了解氟苯尼考在土壤环境中残留对解磷菌的影响,试验建立土壤模型,利用微量肉汤二倍稀释法和Kirby Bauer(K-B)纸片扩散法测定土壤解磷菌对氟苯尼考等17种抗菌药的敏感性;采用ARDRA和ERIC-PCR分析方法测定氟苯尼考对土壤解磷菌基因多样性的影响;采用钼锑抗分光光度法测定氟苯尼考对土壤解磷菌解磷能力的影响。主要研究结果如下:1.氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌耐药性的影响将氟苯尼考加入土壤中,使土壤含药浓度分别为0 mg/kg、0.1 mg/kg、1 mg/kg、10 mg/kg、100 mg/kg,采集加药前和加药后7 d、21 d、49 d的土样分离解磷菌。利用微量肉汤二倍稀释法和K-B纸片扩散法测定加药前与加药后土壤解磷菌对氟苯尼考及其他16种抗菌药的敏感性。结果表明,土壤解磷菌的耐药性和耐药率与氟苯尼考的残留浓度及作用时间成正比。17种抗菌药中,对氟苯尼考耐药的解磷菌对其中13种抗菌药的敏感性有不同程度的降低(P<0.05);对3种抗菌药不敏感(P>0.05);林可霉素对解磷菌无抑制作用。2.氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌基因多样性的影响提取加药前和加药后7 d、21 d、49 d从土样中分离的解磷菌DNA,选用细菌引物27F和1492R扩增16S r DNA基因序列,选用Msp I、Afa I限制性内切酶进行ARDRA分析。结果显示,氟苯尼考残留浓度越大,OTUs类型数越少,药物作用21 d时,在100 mg/kg氟苯尼考浓度下,OTUs数/细菌数比值最低,为8.33%。对加药后21 d的解磷菌进行ERIC-PCR扩增,结果显示,药物浓度越高,ERIC-PCR图谱类型越少,多样性指数也随之降低。3.氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌解磷能力的影响从土壤中分离得到10株解磷菌,将菌株接种至LB液体培养基中,30℃培养24 h作为种子液。在无机磷液体培养基中加入氟苯尼考,使培养基含药浓度分别为:0μg/m L、0.1μg/m L、1μg/m L、10μg/m L、50μg/m L。按照1%的接种量接种解磷菌,30℃培养5 d,每24 h取2 m L培养液,利用钼锑抗分光光度法测定培养液中速效磷含量。结果表明,10株解磷菌在50μg/m L药物浓度下,培养基中速效磷含量明显比其他药物浓度组的低;大部分菌株在0~50μg/m L的药物浓度区间内菌液中细菌数量变化不明显,0μg/m L和50μg/m L的药物浓度下,菌液浓度几乎一致。研究结果表明,氟苯尼考残留于土壤中导致解磷菌产生耐药性,且浓度越高,解磷菌基因多样越低,高浓度的氟苯尼考对解磷菌的解磷能力有一定的抑制作用。
其他文献
壳寡糖(COS)有较强的抗菌、抗炎和免疫增强功能,已被利用开发为功能饲料添加剂。但迄今为止,有关壳寡糖的肠道转运方式及免疫增强功能的机制尚不完全清楚,限制了药代学过程的阐明以及临床推广。本研究在确定COS灌服后的组织分布和代谢规律基础上,利用TMT蛋白质组学和真核有参转录联合分析,搜寻肠道COS潜在的跨膜转运关键分子。利用基因过表达/沉默等技术,进一步验证肠道COS的潜在跨膜转运分子。随后,研究了
学位
狮头鹅是我国著名的地方品种及唯一的大型鹅种,以卓越的肉用性能而闻名,有“世界鹅王”之美誉,但就巢性极强,产蛋量极少,严重阻碍其产业化发展。传统的产蛋性能选育方法耗时耗力且不能从遗传上减少狮头鹅的就巢性,致使遗传进展缓慢。分子标记辅助选择技术不受外界影响,准确有效的筛选出与产蛋性能密切相关的基因,了解这些基因对产蛋与就巢等性状的调控机制并应用于育种实践,对狮头鹅重要经济性状的分子育种及产业发展具有重
学位
肠道炎症和氧化应激严重影响养猪业的正常发展。黄芩苷是一种具有抗炎和抗氧化生物学活性的天然植物提取物,目前黄芩苷及黄芩苷正丁酯是否具有较好地缓解肠道炎症及氧化应激的作用尚不清楚。因此本研究在体内和体外模型中分别构建实验性肠道炎症和氧化应激模型,不同浓度的黄芩苷及黄芩苷正丁酯进行预处理,以此探究黄芩苷及黄芩苷的对于肠道炎症和氧化应激的作用及机制。研究发现:(1)LPS会导致IPEC-J2细胞中炎症因子
学位
炎性肠病(IBD)严重影响动物的消化吸收能力,导致生长发育和生产性能下降,给养殖业带来巨大经济损失。研究开发具有免疫调节、肠道屏障和菌群稳态维持功能的天然活性物质备受关注。丁内酯-Ⅰ(BTL-1)是从海洋真菌土曲霉菌中提取的一种代谢物,具有较好的抗炎和粘膜修复活性,有开发为功能饲料添加剂的潜力。但有关其保护动物肠道屏障功能和缓解炎症反应的效果及潜在机制尚不清楚,限制了进一步的开发应用。为了综合评价
学位
芒果炭疽病是芒果第一大真菌病害,严重影响芒果产业发展。本课题组前期对农业农村部热带果树种质资源圃保存的300多份芒果核心资源进行了多年的抗性评价,确定了‘金煌’为炭疽病高抗品种,‘爱文’为高感品种,并以‘金煌’为母本‘爱文’为父本构建杂交群体,获得杂交后代170株。本研究以该杂交F1代为材料,采用室内离体接种法评价了F1代抗性等级,利用全基因组重测序结合抗病性数据进行全基因组关联分析,筛选到与抗炭
学位
教育要通过"生活来进行""过艺术的生活便是受艺术的教育",陶行知先生留下了这样珍贵的启示。为幼儿打造一个富有生活情趣的审美活动环境,在接触生活的基础上遴选话题,依托生活化的组织形式、借助生活化材料进行创造性表达。让幼儿时时处处感受生活中的美,用自己的理解创意表现,逐步提高审美表现力,从而让自己拥有一个幸福、有品味的人生。
期刊
牛肉具有独特风味和高营养价值,随着生活水平的提高,人们对牛肉的需求量也大大提高。本课题组前期在日本和牛与草原红牛背最长肌转录组学分析发现,泛酰巯基乙胺酶1(Vanin-1,VNN1)是两种牛背最长肌的差异基因之一,这提示我们VNN1可能是影响牛肉质性状的关键候选基因。泛酰巯基乙胺酶(Vanin,VNN)是一类水解酶,它能将泛酰巯基乙胺水解成泛酸和半胱胺。VNN1是Vanin家族中的一个亚型,存在于
学位
马氏珠母贝作为一种重要的海水育珠贝类,探究其贝壳生长的分子机制具有重要意义。课题组前期通过GWAS分析关联到一个Lnc RNA033033与马氏珠母贝贝壳生长性状显著相关。因此,本研究对Lnc RNA033033进行鉴定和功能研究,并探究其通过介导章鱼胺信号分子调控马氏珠母贝生长的作用机制。主要研究结果如下:1.LncRNA033033的鉴定和功能研究通过克隆获得LncRNA033033,序列全长
学位
妇科肿瘤学诊疗过程中不仅需暴露患者隐私部位,同时由于肿瘤疾病的特殊性,患者常存在较重的思想负担。因此医师不仅需要具备专业的操作技术,同时还需要良好的职业道德。将思政教育融入妇科肿瘤教学,多方位扩展妇科肿瘤学课程的深度及广度有重要意义。该文从妇科肿瘤课程与思政教育的有机结合过程中的问题及策略进行总结,从而实现妇科肿瘤专业课程与思政教育的有机融合,达到教学育人的目的。
期刊
禽流感(Avian Influenza,AI)是由正粘病毒科流感病毒属的A型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的禽类高度接触性传染病。在禽流感病毒的16个HA亚型中,H1亚型虽然是低致病性禽流感病毒,但具有广泛的宿主谱,能够突破宿主屏障传播至其他动物乃至人类,对养殖业造成极大经济损失同时威胁着人类的健康。因此,建立快速诊断方法十分必要。本研究制备了H1亚型AIV单
学位