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一、生物样品中硫普罗宁的定量分析方法本章主要内容为建立两种柱前衍生化HPLC-UV分析方法,分别用于大鼠血浆和小鼠组织样品中硫普罗宁的测定。采用Diamonsil C18 (200×4.6 mm,5μm)柱,甲醇-水-磷酸(60：40：0.1,v／v／v)为流动相,N-对甲氧基苯甲酰氨基丁酸为内标。生物样品经对溴苯甲基溴(p-BPB)衍生化后,用乙酸乙酯进行萃取。大鼠血浆中硫普罗宁在0.5-32.0μg·mL-1浓度范围内线性关系良好。低、中、高3个浓度质控样品的日内精密度分别为3.23%,6.00%和4.92%,日间精密度分别为9.04%,4.60%和10.7%,准确度分别为103.3%,101.7%和100.1%,提取回收率在70%以上。小鼠组织中硫普罗宁在5.0-500.0μg·g-1浓度范围内线性关系良好,低、中、高3个浓度质控样品的日内精密度分别为4.98%,7.49%和8.86%,日间精密度分别为9.79%,4.48%和8.61%,准确度分别为96.8%,101.6%和99.5%,提取回收率在70%以上。二、硫普罗宁的药动学及组织分布研究本章主要内容为硫普罗宁注射剂及其联用丹参注射剂在大鼠体内药动学研究,硫普宁注射剂及其联用丹参注射剂在小鼠体内的组织分布研究。大鼠药动学研究表明,大鼠血浆中3个剂量组Cmax,AUC0-t与给药剂量的比值经方差分析,结果表明3组比值无显著性差异,符合线性动力学特征。联合给药组与单独中剂量给药组进行t检验结果表明,两者药动学参数中AUC0-t、AUC0-∞和Cl值有显著性差异,AUCo-t下降了45.0%(P<0.05),AUC0-∞下降了53.2%(P<0.05),Cl增加了53.4%。表明丹参注射液改变了硫普罗宁在大鼠体内的药动学过程。小鼠组织分布研究表明药物进入血液后迅速分布于各脏器组织中,肺中组织浓度最高,维持时间亦长；肝做为靶向组织浓度不是最高,但也保持着较高的浓度。在胃中不易吸收,而在肠中浓度较高。心、脾等组织中分布不具优势,维持时间短。联合用药在组织分布上,并不会改变硫普罗宁在各个组织的亲和力。三、硫普罗宁人体药动学和生物等效性研究本章主要内容为建立一种LC-MS/MS法,测定人血浆中硫普罗宁浓度,并研究两种硫普罗宁制剂的药动学及人体相对生物利用度。采用Zobax XDB-C18(150×4.6 mm,5μm)柱,乙腈-水(含1%的甲酸)(95：5,v／v)为流动相,N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)为内标。血浆样品预处理采用液-液萃取法。人血浆中硫普罗宁在25.0-5000 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好。低、中、高三个浓度质控样品的日内精密度分别为7.66%,6.83%和7.84%,日间精密度分别为2.51%,14.1%和11.8%,准确度分别为98.9%,96.3%和100.1%,提取回收率在70%以上。采用双周期自身交叉试验,20名健康受试者口服硫普罗宁受试制剂和参比制剂200mg后,Tmax分别为(4.20±1.01)和(3.85±0.99)h,Cmax分别为(4456±2447)和(4765±2015)ng.mL-1,t1/2分别为(5.96±4.37)和(5.61±4.42)h,AUCo-t分别为(20903±8085)和(20566±9902)ng.h.mL-1,AUC0-∞分别为(22088±8914)和(21696±11054)ng·h·mL-1。