成年绵羊(Ovis avies)和胎羊血液中差异表达基因的克隆

来源 :中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pploa
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绵羊胚胎发育过程中血液的发生和血细胞的成熟是一个复杂的过程,涉及到由造血干细胞分化为髓系干细胞和淋巴系干细胞,然后进一步发育为成熟的血细胞.在此过程中,细胞中的mRNA水平和蛋白质水平均发生变化.该论文以中国绵羊作为实验材料,通过改进后的mRNA差异显示技术,比较母羊血液和胎羊血液中基因表达的差异,寻找绵羊胚胎血液形成过程中特异表达的基因.通过mRNA差异显示方法,共发现差异片段30条,其中20条与已知序列同源,通过检索发现大部分是与发育相关的基因片段.选定一条感兴趣的差异片段,通过5RACE方法获得了包含完整编码框的长度为1209bp的cDNA序列,编码261个氨基酸.对此序列进行了开放阅读框(ORF)和氨基酸序列结构分析,并进行了功能预测.序列分析结果发现它与人和小鼠中的富含亮氨酸的酸性核磷蛋白32家族成员B具有很高的同源性,氨基酸序列的同源性分别为91%和80%.它的氨基酸序列结构包括N末端5个LRRs,C末端的一个酸性区,三个磷酸化位点和一个假定的核定位信号,根据核酸和氨基酸序列同源性比较结果和氨基酸序列结构分析,推断它是富含亮氨酸的酸性核磷蛋白32家族的新成员.第一次在绵羊中发现这种蛋白,命名为SLAN,推测它与胎羊胚胎血细胞的发生和成熟相关.
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