自体骨髓源性成体干细胞移植治疗急性肾小管坏死的实验研究

来源 :第一军医大学 南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daren19112879
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目的: 建立兔肾脏缺血再灌注(ischemic-reperfusion,I/R)损伤诱发急性肾小管坏死动物模型,采用经肾动脉灌注途径向肾脏内移植自体骨髓单个核细胞,观察骨髓源性干细胞对急性肾小管坏死肾功能的影响和骨髓源性干细胞是否具有向损伤肾组织归巢的能力及其在肾脏组织中的分布,初步探讨骨髓源性干细胞移植促进急性肾小管坏死修复的作用和可能机制,以及细胞移植的有效途径,为骨髓源性干细胞移植治疗急性肾小管坏死提供实验依据。 方法: 1.实验动物分组:健康日本大耳白兔42只,随机分成2组,每组21只。①移植组,I/R损伤+自体骨髓单个核细胞肾动脉灌注:②对照组,I/R损伤+等量生理盐水肾动脉灌注。 2.骨髓单个核细胞的制备及细胞标记:兔髂前上嵴局部注射普鲁卡因麻醉后抽取10ml骨髓液,通过密度梯度离心法分离出骨髓单个核细胞,制成细胞悬液,将其移入含10ml DMEM/F12完全培养基的25cm~2的培养瓶内,调整细胞浓度为3×10~5个/ml,加入5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU),使其终浓度为20μmol/L,对骨髓单个核细胞进行标记,置入体积分数
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